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临检室红细胞形态学检查标准操作程序
一.目的:规范红细胞形态学检查标准操作
二.适用范围:适用于瑞氏—姬姆萨染色镜检法红细胞形态学
检查。
三.支持性文件:全国临床检验操作规程第三版
四.原理:瑞氏—姬姆萨染色镜检法
五.仪器:PH100光学显微镜
六.试剂瑞氏—姬姆萨复合染色液
I液:取瑞氏染粉1g、姬姆萨染粉0.3g,置洁净研钵中,加
少量甲醇(分析纯),研磨片刻,吸出上层染液。再加少量甲
醇,继续研磨,再吸出上液。如此连续几次,共用甲醇500ml。
收集于棕色玻璃瓶中,每天早、晚各振摇3min,共5天,以
后存放一周即能使用。
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Ⅱ液:pH6.4—6.8磷酸盐缓冲液
磷酸二氢钾(无水)6.64g
磷酸氢二钠(无水)2.56g
加少量蒸馏水溶解,用磷酸盐调整pH,加水至1000ml。
七.样本要求:毛细血管采血使用市售一次性使用的采血针,
采血部位成人以左手无名指为宜,半岁以上儿童手指为好,
半岁以下婴幼儿通常自拇指或足跟两侧采血。采血时应擦去
第一滴血,以免混入组织液影响结果。
八.操作步骤:
1.采血后推制厚薄适宜的血膜片,血膜应呈舌状,头、体、
尾清晰可分。
2.推好的血膜在空气中晃动,以促使快干。天气寒冷或潮
湿时,应于37C温箱中保温促干,以免细胞变形缩小。
3.染色
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(1)瑞氏—姬姆萨染色法:平置玻片于染色架上,滴加染液3~
5滴,使其迅速盖满血膜,约lmin后,滴加缓冲液5~10滴,
轻轻摇动玻片或对准血片吹气,与染液充分混和,5~lOmin
后用水冲去染液,待干。
4.选择涂片的体尾交界处染色良好的区域,观察红细胞形
态。
5.结果输入上海新和中文操作系统打印报告。
九.异常红细胞形态
1、大小异常
正常红细胞大小较为一致,直径为6~9μm,在各种贫血时,
红细胞可出现大小不一,凡直径10μm者称大红细胞;15μm
者称巨红细胞,常见于巨幼细胞性贫血、肝脏疾病等;直径
6μm者称为小红细胞,多见于缺铁性贫血等疾病。
2、形态异常
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(1)球形红细胞
红细胞直径通常6μm,厚度增加,通常2.6μm,因而红细
胞呈小圆球形,细胞中心区血红蛋白含量较正常红细胞多,
常见于下列疾病:
a.遗传性球形细胞增多症;
b.自身免疫性溶血性贫血;
c.异常血红蛋白病(HbS及HbC病等)。
(2)椭圆形红细胞
红细胞呈椭圆形,横径缩短,长径增大,有时可呈畸形。正
常人血液中也可见到,但最多不超过15%。这种红细胞增多
见于:
1.遗传性椭圆形细胞增多症,一般要高于25%~50%才有
诊断价值。
2.大细胞性贫血,可达25%。
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3.其他各类贫血都可有不同程度的增多。
(3)靶形红细胞
比正常红细胞扁薄,中心有少许血红蛋白,部分可与周围的
血红蛋白连接,边缘部染色深,故呈靶状。主要见于:
1.地
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