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第八章血液常规检查检验程序
检测血液中红细胞、白细胞与血小板数量、白细胞分类及相
关参数(HGB、HCT、MCV、MCH、MCHC、RDW及MPV等)的变化对临床
有关疾病的诊断、观察疾病的变化及治疗效果具有重要参考价
值。现根据ISO15189文件―?医学实验室质量与能力专用要求?
的规定,以SF-3000、ADVIA-120与BC-2000血细胞分析仪为例进
展介绍。
第一节血细胞分析仪检测原理
血常规检查方法采用血细胞自动分析仪法,参见?全国临床检
验操作规程?p7~11,白细胞分类计数采用显微镜检查法,参见?
全国临床检验操作规程?p5~7。现简要介绍如下。
一、电阻抗法血细胞计数
在细胞检测器微孔的两侧各有一个电极,两电极间通有恒定
电流,经过稀释液(电解质溶液)稀释的血样(血细胞)在通过检测
器微孔时,产生了一个电脉冲;脉冲的上下代表细胞体积的大小,
脉冲的个数代表细胞的数目。记录脉冲的数目可以得到细胞计数
的结果。
二、细胞化学与光散射法白细胞计数
将血液经过细胞化学试剂染色,不同的白细胞胞浆内部即可
出现不同的酶化学反响。当这些白细胞通过测量区时,由于酶反
响强度不同与细胞体积大小差异,激光束射到细胞上的前向角与
散射角不同,以X轴为吸光率,Y轴为光散射,每个细胞产生两个
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信号结合定位在细胞分布散点图上。计算机对存储的测量信息进
展分析处理,得出白细胞总数与分类计数结果。适用于ADVIA-120
血细胞分析仪。
三、多角度激光法白细胞计数
在白细胞分类通道:全血参加溶血剂(FD-Ⅰ与FD-Ⅱ)作用后,
嗜酸性粒细胞内颗粒被染色;其他白细胞略有皱缩。WBC/BASO
通道:全血参加溶血剂(FB)溶血。除BASO外,其他白细胞均明显
皱缩。仪器从低角度及高角度分析白细胞的内部构造。计算机对
存储的测量信息进展分析处理,得出白细胞总数与分类计数结
果。适用于SF-3000血细胞分析仪。
四、光电比色法测量血红蛋白
在稀释的血样中参加溶血剂使红细胞膜破裂释放出血红蛋
白,后者与溶血剂中有关成分结合形成Hb衍生物,进入Hb测试系
统,在特定波长(一般在530~550nm)下比色,吸光度的变化与液
体中Hb含量成正比,仪器便可显示其浓度。不同型号的血细胞分
析仪配套溶血剂配方不同,形成的Hb衍生物亦不同,其吸收光谱
各异但最大吸收均接近540nm。
五、光散射法红细胞与血小板计数
以二维激光散射法检测红细胞与血小板。红细胞测试原理是:
在测试系统中,全血与红细胞/血小板稀释液混合,使自然状态
下双凹盘状扁平圆形的红细胞成为球形并经戊二醛固定,此种处
理并不影响MCV体积。红细胞无论以何种方位通过测量区时,被
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激光束照射后所得的信号是一样的。激光束以低角度前向光散射
与高角度光散射同时测量一个红细胞,根据低角度光散射转换能
量大小,测量单个红细胞体积与总数;根据高角度光散射得出单
个红细胞内血红蛋白浓度。血小板与红细胞在一个系统中测量,
其原理是:根据同质性球体光散射的Mie理论,当球形化的血小
板单个通过激光照射区时,仪器在两个角度测定激光的散射强
度:高角度主要测细胞的折射指数(RI),它与细胞的密度有关;
低角度主要测细胞体积的大小。血小板的体积在1~30fl,RI
在~。计算机对存储的测量信息进展分析处理,得出红细胞与血
小板计数结果。适用于ADVIA-120血细胞分析仪。
六、显微镜白细胞分类计数
把血液制成细胞分布均匀的薄膜涂片,经瑞氏染料染色后,
在显微镜下根据白细胞形态特征予以分类计数,得出相比照值
(百分率),并观察细胞形态的变化。
第二节仪器性能参数
血细胞分析仪的操作性能因仪器的种类与型号不同而异。
一、SF-
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