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无菌检查法（逐字对比20版药典变化）

无菌检查法，逐字对比20版药典变化

无菌检查的定义及无菌检查的适用条件

无菌检查法系用于检查药典要求无菌的药品、生物制品、医疗器

械、原料、辅料及其他品种是否无菌的一种方法。若供试品符合无菌

检查法的规定，仅表明了供试品在该检验条件下未发现微生物污染。

无菌检查应在无菌条件下进行，试验环境必须达到无菌检查的要

求，检验全过程应严格遵守无菌操作，防止微生物污染，防止污染的

措施不得影响供拭品中微生物的检出。单向流空气区域、工作台面及

受控环境应定期按医药工业洁净室（区）悬浮粒子、浮游菌和沉降菌

的测试方法的现行国家标准进行洁净度确认。

培养基的制备及培养条件

培养基可按以下处方制备，亦可使用按该处方生产的符合规定的

脱水培养基或成品培养基商品化的预制培养基。

胰酪胨1.50g

氯化钠2.5g

酵母浸出粉5.0g

葡萄糖/无水葡萄糖5.5g/5.0g

新配制的0.1%刃天青溶液1.0ml

L-胱氨酸0.5g

琼脂0.75g

硫乙醇酸钠0.5g

水1000ml

(或硫乙醇酸）（0.3ml）

除葡萄糖和刃天青溶液外，取上述成分混合，微温溶解，调节PH

为弱碱性，煮沸，滤清，加人葡萄糖和刃天青溶液，摇匀，调节PH,

使灭菌后在25℃的PH值为7.1土0.2。分装至适宜的容器中，其装量

与容器高度的比例应符合培养结束后培养基氧化层（粉红色）不超过

培养基深度的1/2。灭菌。

2、胰酪大豆胨液体培养基

▲该项目下2020版药典四部通则与2015版药典四部通则内容无

变化

3、中和或灭活用培养基

按上述硫乙醇酸盐流体培养基或胰酪大豆胨液体培养基的处方及

制法，在培养基灭菌前或使用前加人适宜的中和剂、灭活剂或表面活

性剂，其用量同方法适用性试验。

4、0.5%葡萄糖肉汤培养基（用于硫酸链霉素等抗生素的无菌检

查）

▲该项目下2020版药典四部通则与2015版药典四部通则内容无

变化

5、胰酪大豆胨琼脂培养基

▲该项目下2020版药典四部通则与2015版药典四部通则内容无

变化

6、沙氏葡萄糖液体培养基

▲该项目下2020版药典四部通则与2015版药典四部通则内容无

变化

7、沙氏葡萄糖琼脂培养基

▲该项目下2020版药典四部通则与2015版药典四部通则内容无

变化

培养基的适用性检查

无菌性检查

每批培养基一般随机取不少5支（瓶），置各培养基规定的温度

培养14天，应无菌生长。

灵敏度检查

菌种培养基灵敏度检查所用的菌株传代次数不得超过5代(从菌种

保存中心获得的干燥

菌种为第0代），并采用适宜的菌种保藏技术进行保存和确认，

以保证试验菌株的生物学特性。

▲除上述内容外其他内容无变化。

菌悬液若在室温下放置，一般应在2小时内使用；若保存在2-8℃

可在24小时内使用。黑曲霉孢子悬液可保存在2-8℃，在验证过的贮

存期内使用。

结果判定空白对照管应无菌生长，若加菌的培养基管均生长良好，

判该培养基的灵敏度检查符合规定。

稀释液、冲洗液及其制备方法

稀释液、冲洗液配制后应采用验证合格的灭菌程序灭菌。

1.0.1%无菌蛋白胨水溶液取蛋白胨1.0g，加水1000ml，微温溶

解，滤清必要时滤过使澄清，调节pH值至7.1士0.2，分装，灭菌。

2.pH7.0无菌氯化钠-蛋白胨缓冲液取磷酸二氢钾

3.56g，无水磷酸氢二钠5.77g，氯化钠

4.30g，蛋白胨1.00g，加水1000ml，微温溶解，滤清必要时滤

过使澄清，分装，灭菌。

根据供试品的特性，可选用其他经验证的适宜溶液作为稀释液或

冲洗液（如0.9%无菌氯化钠溶液）。

如需要，可在上述稀释液或冲洗液的灭菌前或灭菌后加入表面活