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局灶性脑缺血动物模型制作步骤及方法

大脑中动脉(Middlecerebralartery,MCA)是人类脑卒中的多发部位，

大脑中动脉闭塞(Middlecerebralarteryocclusion,MCAO)模型被普遍

认为是局灶性脑缺血的标准动物模型，主要方法有线栓法、电凝法、

光化学法和血栓栓塞法。

1线栓法(threadocclusionofthemiddlecerebralartery)

(1)复制方法雄性SD大鼠，体重为250～300g。经腹腔注射水合氯

醛(350～400mg/kg体重的剂量)或戊丨巴丨比丨妥丨钠(50～

60mg/kg体重的剂量)麻醉，仰卧位固定，剃除颈部毛发，手术区域

皮肤常规消毒。切开右侧颈部皮肤，钝性分离胸锁乳突肌和胸骨舌骨

肌，显露右侧OCA及迷走神经。结扎CCA、颈外动脉(exterialcerebral

artery,ECA)及其分支动脉。分离右侧颈内动脉(interialcerebralartery,

ICA)，至鼓泡处可见其颅外分支翼腭动脉，于根部结扎该分支。在ICA

近端备线、远端放置动脉夹，在ECA结扎点(距颈内、颈外动脉分叉

5mm处)剪一小口，将一直径为0.22～0.249mm(4-0号)的尼龙线经

ECA上剪口插入。插入前加热处理使插入端变钝(也可在尼龙线头端

用L-多聚赖氨酸涂抹后置肝素中浸泡，使成功率增高，梗塞面积恒

定)，并做好进入线长度标记。扎紧备线，松开动脉夹，将尼龙线经

ECA、ICA分叉处送入ICA，向前进入17～19mm时会有阻挡感，说

明栓线已穿过MCA，到达大脑前动脉的起始部，堵塞MCA开口，造

成脑组织局部缺血。1～3h后可缓慢退出尼龙线实施再灌注。

(2)模型特点线栓法的优点为：无须开颅，动物损伤小，MCA闭塞效

果较为理想，目前该模型被认为是惟一能观察到再灌流的局灶性脑缺

血模型，近年来较为常用。注意点：线选择极为重要，较细时不容易

穿到MCA，且缺血不明显；较粗时缺血重，容易造成实验动物的死

亡。线要有的刚性，才能穿进ICA并穿进颅内，钢性过强则容易穿透

动脉引起颅内出血。穿线位置也应当根据实验条件摸索。为提高线拴

法大鼠局灶性脑缺血模型的成功率和稳定性，有学者研究了大鼠体重、

拴线插入长度和直径与MCAO模型成功的关系，用正交试验法得出

造模型的方案是采用大鼠体重为250～300g，线长为17m/n或18mm，

线直径为0.28mm制作MCAO模型。成功率高、重复性较好。

2电凝法(electriccoagulate)

(1)复制方法SD大鼠，雌雄不拘，体重为250～300g。经腹腔注射水

合氯醛(350～400mg/kg体重的剂量)或戊丨巴丨比丨妥丨钠(50～

60mg/kg体重的剂量)麻醉后右侧卧位，剃除颈部毛发，手术区域皮

肤常规消毒。在左侧眼外眦到左外耳道连线的中点，垂直于连线切开

皮肤约2cm。沿颧弓下缘依次切断咬肌和颞肌，将这些肌肉推向前上，

操作时避免损伤面神经及动脉。用牙科钻在颧骨和磷状骨前联合前内

2mm处钻孔开颅。在手术显微镜下切开硬脑膜，暴露并游离MCA。

用双电极(电压12V)电灼损毁大脑动脉环起始至嗅沟段的MCA。为防

止电极的电流对脑组织造成电损伤，在操作过程中不断向MCA周围

滴加生理盐水并尽量减少电极在MCA上的作用时间。

(2)模型特点开颅法的优点是实验条件较稳定，缺血效果可靠，是经

典性缺血模型，在程度上模拟了人类一侧大脑半球缺血性梗死的情况。

缺点是开颅法干扰了脑脊液动力学，易感染、创伤大，且闭塞后无法

进行再灌注损伤。电凝并切断MCA起始部至大脑下静脉之间或嗅束

内侧2mm至大脑下静脉之间的一段MCA后，可阻断豆纹动脉及近

端小皮质支的侧支血流，在基底核区和皮质形成较恒定的梗死灶，梗

死发生率可达100％。因此大鼠出现严重的神经功能缺失体征，且与

梗死范围有显著相关性，从而为研究不可逆性脑缺血提供了可靠的动

物模型。

3光化学法(photochemistry)

光化学刺激可造成严重的血管内皮损伤，在短时间内光照区内的血管

即可发生性血栓形成，进而形成局灶性的梗死灶。实验动物可选用兔、

大鼠或豚鼠等造模。

(1)复制方法动