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POCT的研究进展及应用
一、POCT
随着经济的发展、社会进步和人口整体素质的提高,重视个体健康信息的人群不断上升。因此,临床
检验的发展将呈现两极分化的趋势。一方面是在维护人体健康过程中需要掌握的信息量越来越大,而人的
社会分工越来越细,这就需要未来的临床检验发展向高分析速度、高自动化程度、高智能化水平、高速网
络化信息传递、高精密度分析结果的要求发展,这就是所谓的临床实验室发展趋向中心化。另一方面是目
前国内外医疗机构中除需要具有较大规模的中心医院外,还有家庭及社区医疗服务的需要。20世纪后期,
急救医学的快速发展,在紧急救治过程中需要及时掌握病人各种生理、生化指标的变化。随着人们生活水
平的提高,互联网、报纸、电视等传媒的快速发展,人们对有关医疗、保健知识的了解及关心程度不断提
高,某些正常、亚健康和带病人群需要经常了解自己体内与疾病发生、发展密切相关检验指标的变化。上
述需求促使临床检验仪器向携带便捷、无需专业人员操作、结果即时可得的所谓POCT检验方向发展。
“POCT”是英文point-of-caretesting的缩写。由于在英文文献中一些不同的名称被使用,如nea
r-patienttesting,on-sitetesting,bedsidetesting,homeusetesting,extralaboratoryte
sting等,从而给其中文名称及其准确定义造成一定的困难。但从目前情况来看,“床旁检验”已被大多
数人所接受。笼统的POCT定义,主要是指一些操作简便(非专业检验人员只要经过简单培训就可以操作),
能够在中心实验室之外,如:病房、病人住所、医生办公室、急诊科、手术室、救护车上、战场、甚至学
校、工厂等任何场所,开展的检验技术。由于POCT具有操作简便、快速、效率高、成本低,试剂稳定且便
于保存和携带,检验结果具有可比性等优点,目前正显示出良好的发展势头。
二、基本原理
POCT与中心实验室一样要依赖各种现代分析技术的支持,如:化学、酶、酶免疫、免疫层析、免疫标
记、电极、色谱法、光谱法、生物传感器、光电分析等技术。
1.胶体金免疫标记技术
氯金酸(HAuCl4)在还原剂作用下,可聚合成一定大小的金颗粒,形成带负电的疏水胶溶液,由于静电
作用而成为稳定的胶体状态,故称胶体金。免疫金标记技术类似与酶免疫技术,它是用胶体金标记单克隆
抗体,可用于快速检测蛋白质类和多肽类抗原,如激素、心肌肌钙蛋白T(cTnT)、血清白蛋白、高敏C
反应蛋(hs-CRP)及一些病毒如乙型肝炎病毒(HBV)、丙型肝炎病毒(HCV)、爱滋病病毒(HIV)抗原和
抗体测定。
(1)免疫层析技术
将金标抗体吸附于下端的玻璃纤维纸上,浸入样品后,此金标单抗即被溶解,并随样品上行,若样品
中含有相应抗原时,既形成Ab-Ag-Ab-金复合物,当上行至中段醋酸纤维薄膜,即与包被在膜上的抗原(抗
体)结合并被固定呈现红色线条(阳性结果)。
免疫层析技术问世已有十多年时间,并取得了惊人发展,其可检测项目已达数十种。如心肌标志物,激素
和各种蛋白质等,多为定性试验。基质中分析物的分离是通过纸层析法完成的,并且免疫层析法是凭借固
定在层析带表面的特异性抗体捕获目标分析物,反应后观察反应区的颜色有无变化,用于定性分析。另外
也有小型定量测定仪,如瑞士Roche公司的心肌标志测读仪(CardiacReader),可用于测定肌钙蛋白T和肌
红蛋白,以及D-二聚体等。定量测定甲胎蛋白和HCG的金标检测技术已在国内研发成功。
(2)免疫斑点渗滤技术
其原理与层析法相类同,将包被有特异性待测物抗原(抗体)的醋酸纤维薄膜放置在吸水材料上面,
当样品滴加到膜上后,样品中的待测物质结合到膜上的抗原(抗体)上。洗去膜上的未结合成分后,再滴
加金标抗体,若样品中含有目标物质,膜上则呈现Ab-Ag-Ab-金复合物红色斑点。该技术目前已被广泛应
用于结核杆菌等细菌的抗原或抗体检测,从而达到细菌的快速鉴定。
2.干化学技术
将一种或多种反应试剂,干燥固定在固体载体上(纸片、胶片等),用被测样品中所存在的液体作反
应介质,被测成分直接与固化于载体上的干试剂进行呈色反应。
(1)单层试纸技术
包括单项检测试纸和多项检测试纸。单项试纸一次只能测一个项目,如目前被广泛应用的血糖检测试
纸、血氨检测试纸、尿糖检测试纸等。而多项检测试纸一次在一条试纸条
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