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实验一血清蛋白质醋酸纤维素薄膜电泳--第1页
实验一血清蛋白质醋酸纤维素薄膜电泳
【实验目的】
（1）了解电泳的一般原理，掌握醋酸纤维素薄膜电泳操作技术。
（2）测定人血清中各种蛋白质的相对百分含量。
【实验原理】
带电荷的胶体粒子在电场中移动的现象称电泳。醋酸纤维素薄膜电泳法是以醋酸纤维素
薄膜作为支持物。
血清中含多种蛋白质，当在pH这8.6时，这些蛋白质均带负电，它们在电场中向阳极
移动，由于各种蛋白质所带负电荷多少及颗粒大小不同，所以在同一电场，同一pH环境中
涌动速度不同。
本实验以醋酸纤维素为电泳支持物，分离各种血清蛋白。血清中含有清蛋白，α~球蛋
白，β~球蛋白，γ~球蛋白和各种脂蛋白等。各种蛋白质由于氨基酸组分，立体构象，分子
量，等电点及形状不同，在电场中迁移速度不同。分子量小，等电点低，相同碱性pH。
表1人血清中12种蛋白质的等电点及分子量
蛋白质名称等电点（pl）分子量
清蛋白4.8869000
α~球蛋白5.06α—200000
1
α—300000
2
β~球蛋白5.1290000—150000
γ~球蛋白6.85-7.50156000—30000
缓冲体系中，带负电喝多的蛋白质颗粒在电场中移动速度快。例如，以醋酸纤维素薄膜
为支持物，正常人血清中pH=8.6的缓冲体系中电泳1h左右，染色后可显示5条区带。清
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蛋白泳动最快，其余依次为α~，α~,β~及γ~球蛋白。这些区带经洗脱后可用分光光度法定
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量，也可直接进行光吸收扫描自动绘出区带吸收峰及相对百分比。临床医学常利用它们异常
区带的出现作为临床鉴别诊断的依据。此法由于操作简单，快速。
图1正常人血清醋酸纤维素薄膜电泳示意图
为清蛋白，2，3，4，5分别为α,α,β~及γ~球蛋白，6为点样原点
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清蛋白球蛋白附注
ααβγ
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妊娠↓↓↑↓中毒时更明显，产后2-3个月正常
婴儿↑↑↑6个月时γ正常，其他成分6-10岁时正常
糖尿病↓
多发性骨髓瘤↑↑↑↑异常球蛋白，可在β和γ区带间出现M区带
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