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永生化胚胎肝细胞系的构建及其生物学特性
作者：李羽，白雪帆，王军，徐哲，张岩
【关键词】永生化；肝细胞；细胞系；生物学特性；SV40；脂质
体
Establishmentandbiologicalcharacterizationofan
immortalizedhumanfetalhepatocyteline
【Abstract】AIM:Toestablishanimmortalizedhuman
fetalhepatocytelineandtostudyitsbiological
characteristicsandfunctions.METHODS:Humanfetalhepatocytes
weretransfectedwithpcDNA3.1recombinedvectorcontainingthe
SimianVirus40largeTantigen.Characteristicsofthe
immortalizedfetalhepatocytelinewereevaluatedby
morphologicandfunctionaldetection.RESULTS:Oneofthe
hepatocyteclonesdisplayinghighlydifferentiatedinliver
functionandimmortalizedcharacteristicshadbeenscreened
after40dayselectionof700-300mg/LG418.Theimmortalized
hepatocytelinemaintainedthemostmorphologiccharacteristics
ofprimaryhepatocyte.Thecellcloneformingratwas31.2%.The
immortalizedhumanfetalhepatocyteshadanormalkaryotypeand
1
werenotabletogrowinsoftagarculture.Ithadtheability
ofcomposingalbuminandtheimmunohistochemicaltestshowed
thattheSV40Tgenehadbeenintegratedintothetransformedcell
genome.CONCLUSION:Theimmortalizedhumanfetalhepatocyte
linehasthesimilarmostmorphologiccharacteristicsand
biologicalfunctiontoprimaryhepatocytes,anditwouldbecome
idealcellmaterialonthestudyofbioartificialliverand
hepatocytetransplantation.
【Keywords】immortalized;hepatocytes;cellline;
characterization;SV40;liposomes
【摘要】目的:构建永生化肝细胞系并对其生物学特性及某
些功能进行研究.方法：利用SV40T基因和真核表达载体pcDNA3.1
经脂质体转染至体外分离培养的人胚胎肝细胞，使其永生化，进一步
鉴定其形态学特征和生物学功能.结果：经G418700～300mg/L筛
选，40d后获得一株阳性克隆.形态学观察发现，该细胞具有原代培
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