2025年高中生物学一轮复习练习：第十一章 生物技术与工程 练习6 基因工程的基本工具与操作程序（含解析）.docxVIP

练习6基因工程的基本工具与操作程序

1.[2023新课标]某同学拟用限制酶（酶1、酶2、酶3和酶4）、DNA连接酶为工具，将目的基因（两端含相应限制酶的识别序列和切割位点）和质粒进行切割、连接，以构建重组表达载体。限制酶的切割位点如图所示。

下列重组表达载体构建方案合理且效率最高的是（）

A.质粒和目的基因都用酶3切割，用E.coliDNA连接酶连接

B.质粒用酶3切割、目的基因用酶1切割，用T4DNA连接酶连接

C.质粒和目的基因都用酶1和酶2切割，用T4DNA连接酶连接

D.质粒和目的基因都用酶2和酶4切割，用E.coliDNA连接酶连接

2.[2021湖北]某实验利用PCR技术获取目的基因，实验结果显示除目的基因条带（引物与模板完全配对）外，还有2条非特异条带（引物和模板不完全配对）。为了减少反应中非特异条带的产生，以下措施中有效的是（）

A.增加模板DNA的量 B.延长热变性的时间

C.延长延伸的时间 D.提高复性的温度

3.[2022辽宁]抗虫和耐除草剂玉米双抗12－5是我国自主研发的转基因品种。为给监管转基因生物安全提供依据，采用PCR方法进行目的基因监测，反应程序如图所示。下列叙述正确的是（）

A.预变性过程可促进模板DNA边解旋边复制

B.后延伸过程可使目的基因的扩增更加充分

C.延伸过程无需引物参与即可完成半保留复制

D.转基因品种经检测含有目的基因后即可上市

4.[2023广东改编]“DNA粗提取与鉴定”实验的基本过程是：裂解→分离→沉淀→鉴定。下列叙述错误的是（）

A.裂解：使细胞破裂释放出DNA等物质

B.分离：可去除混合物中的部分多糖、蛋白质等

C.沉淀：可反复多次以提高DNA的纯度

D.鉴定：加入二苯胺试剂后即呈现蓝色

5.[2023浙江6月]某研究小组利用转基因技术，将绿色荧光蛋白基因（GFP）整合到野生型小鼠Gata3基因一端，如图甲所示。实验得到能正常表达两种蛋白质的杂合子雌雄小鼠各1只，交配以期获得Gata3-GFP基因纯合子小鼠。为了鉴定交配获得的4只新生小鼠的基因型，设计了引物1和引物2用于PCR扩增，PCR产物电泳结果如图乙所示。

图甲

图乙

下列叙述正确的是（）

A.Gata3基因的启动子无法控制GFP基因表达

B.翻译时先合成Gata3蛋白，再合成GFP蛋白

C.2号条带的小鼠是野生型，4号条带的小鼠是Gata3-GFP基因纯合子

D.若用引物1和引物3进行PCR，能更好地区分杂合子和纯合子

6.[2023辽宁]CD163蛋白是PRRSV病毒感染家畜的受体。为实时监控CD163蛋白的表达和转运过程，将红色荧光蛋白RFP基因与CD163基因拼接在一起（如下图），使其表达成一条多肽。该拼接过程的关键步骤是除去（）

A.CD163基因中编码起始密码子的序列

B.CD163基因中编码终止密码子的序列

C.RFP基因中编码起始密码子的序列

D.RFP基因中编码终止密码子的序列

7.[2023湖北]用氨苄青霉素抗性基因（AmpR）、四环素抗性基因（TetR）作为标记基因构建的质粒如图所示。用含有目的基因的DNA片段和用不同限制酶酶切后的质粒，构建基因表达载体（重组质粒），并转化到受体菌中。下列叙述错误的是（）

A.若用HindⅢ酶切，目的基因转录的产物可能不同

B.若用PνuⅠ酶切，在含Tet（四环素）培养基中的菌落，不一定含有目的基因

C.若用SphⅠ酶切，可通过DNA凝胶电泳技术鉴定重组质粒构建成功与否

D.若用SphⅠ酶切，携带目的基因的受体菌在含Amp（氨苄青霉素）和Tet的培养基中能形成菌落

8.[2021山东]粗提取DNA时，向鸡血细胞液中加入一定量的蒸馏水并搅拌，过滤后所得滤液进行下列处理后再进行过滤，在得到的滤液中加入特定试剂后容易提取出DNA相对含量较高的白色丝状物的处理方式是（）

A.加入适量的木瓜蛋白酶

B.37～40℃的水浴箱中保温10～15分钟

C.加入与滤液体积相等的、体积分数为95％的冷却的酒精

D.加入NaCl调节浓度至2mol/L→过滤→调节滤液中NaCl浓度至0.14mol/L

9.[2024哈尔滨九中模拟]限制酶和DNA连接酶是基因工程的工具酶，以下说法正确的是（）

A.限制酶只能切割双链DNA片段，不能切割烟草花叶病毒的核酸

B.DNA连接酶能将单个核苷酸加到已有的核苷酸片段上形成磷酸二酯键

C.E.coliDNA连接酶既能连接黏性末端，也能连接平末端

D.限制酶主要从原核生物中分离纯化而来，所以也能剪切自身的DNA

10.[2024重庆南开中学模拟]常见的启动子可分为三类：组成型启动子，驱动基因在所有细胞、组织和器官中持续表达；组织特异性启动子，调控基因只在某些特定的部位中表达；诱导型启动