辣椒素脂质体在兔耳增生性瘢痕组织中的透皮吸收研究.pdfVIP

辣椒素脂质体在兔耳增生性瘢痕组织中的透皮吸收研究

目的：探讨脂质体包裹的辣椒素对兔耳增生性瘢痕组织的透皮吸收能力。方

法：在兔耳增生性瘢痕模型上进行透皮扩散，比较辣椒素脂质体及其普通商用软

膏剂对瘢痕皮肤的渗透能力。结果：在体瘢痕透皮试验12h后，脂质体组瘢痕组

织中的辣椒素单位面积透皮药量显著高于软膏组(40.03±3.2vs9.01±2.02μg/cm2，

p＜0.01)。结论：在体瘢痕组织透皮试验中，脂质体剂型均表现出优于软膏剂型

的促进辣椒素透皮的能力。

标签：脂质体；辣椒素；增生性瘢痕模型；透皮扩散；

目前在瘢痕的药物治疗研究中发现，多种药物在体外对瘢痕成纤维细胞均有

显著抑制作用，但临床上此类药物的常用外用剂型如软膏、霜剂等，局部应用却

不能达到较好效果，这与皮肤的特殊结构一角质层以及瘢痕缺乏皮肤附件而阻碍

了药物进入皮肤有关。因此找到一种疗效好、全身毒副反应小、又能导入瘢痕皮

内并保持较长作用时间的药物和方法是瘢痕防治的关键。

辣椒素(capsaicin，CAP)是一种天然的植物碱，是辣椒中的主要生物活性成

分。作为神经肽P物质(substanceP，SP)的耗竭剂，新近的研究报道辣椒素具有

显著的抗纤维化作用，可用于瘢痕的防治。

脂质体(liposome，Lip)作为一种透皮给药新剂型，具有皮肤组织靶向性、缓

释性和无毒性的特点。已有的关于辣椒素脂质体制剂在瘢痕组织离体透皮实验

中，已显示了其优于常规局部软膏制剂的促渗透能力的特点。因此，Lip非常有

望成为增生性瘢痕局部治疗药物的良好载体。本实验以兔耳增生性瘢痕模型为对

象，对辣椒素的普通软膏制剂和脂质体制剂的透皮能力进行比较，为寻找一种安

全、有效、方便的外用抗瘢痕药物提供理论依据。

1仪器与试剂

1．1材料：新西兰大白兔；辣椒素标准品(美国SIGMA公司)；辣椒素原

料药(厦门大学)；0.075％(质量比)辣椒素脂质体(自制)；0.075％(质量比)辣椒素

软膏(贵州康运药业)；甲醇、乙氰(均为色谱纯)；其他试剂为分析纯。

1．2仪器：Waters高效液相色谱仪(美国Water公司)，包括Waters515型

泵，Rheonyde7725i进样器，2487双波长紫外检测器，ChromStationTM色谱数

据处理工作站；T18匀浆机(德国IKA公司)；DL－360超声仪(浙江象山县石浦

海天电子仪器厂)；TGL－16G台式高速离心机(上海医用分析仪器厂)。

2方法

2．1检测方法

2．1．1色谱条件以及标准曲线：色谱柱：C18柱；流动相：乙氰：水=60:40，

(V:V)；流速：1.2ml/min；检测波长：280nm：进样量：20μl；室温操作。精取辣

椒素5mg，置于5ml容量瓶中，加入甲醇溶解并稀释至刻度，摇匀得1×103mg/L

辣椒素储备液。精密量取该液25、50、100、200、400μl分别置于10ml容量瓶

中，加入甲醇稀释至刻度，得到2.5、5、10、20、40mg/L的标准液。进样20μl，

记录峰面积。以峰面积为纵坐标，相应质量浓度为横坐标进行线形回归。

2．1．2回收率与精密度：精密量取线性试验下的中间三个浓度的标准液，

依法各自进样3次测定并计算回收率和精密度。

2．2制作瘢痕模型

2．2．1实验动物：选用健康成年新西兰大白兔12只，兔耳健全，雌雄不

拘，体重3.0－3.5kg，分笼饲养。

2．2．2参照Morris氏方法并加以改良建立兔耳增生性瘢痕模型：①用速

眠新0.1ml/kg肌注全身麻醉；②严格无菌操作技术下，在兔耳腹侧面做1cm×1cm

大小创面，去掉兔耳全层皮肤及软骨膜，创缘用烙铁适当烧灼处理，每只兔耳做

4个创面，共96个创面；③术后创面暴露，保持干燥待创面自行愈合，一般需

要18－21天。

2．3在体瘢痕透皮实验及其检测

2．3．1手术后约19天创面完成上皮化时，伴有瘢痕增生，才达到在体透

皮扩散实验的要求。用游标卡尺对创面瘢痕进行测量，以标化用药面积。

2．3．2随机将12只兔的一侧耳设定为辣椒素脂质体用药组，另一侧用辣

椒素软膏作对照组。每一侧的四个标本中随机选取三个用药，余下一个作阴性对

照。在每个