医学课件 CMA应用.pptVIP

CMA芯片技术应用于辅助生殖植入前/产前/产后

先天性疾病诊断的初步应用徐晨明浙江大学医学院附属妇产科医院出生缺陷出生缺陷对胚胎或卵子行卵裂球或极体活检，作染色体和/或基因学检测，将无疾病胚胎植入子宫妊娠，并出生正常子代的技术辅助生殖与遗传学技术相结合的一种产前诊断方法关键点是建立单细胞遗传诊断技术染色体疾病的诊断在人类染色体研究历史上,研究者一直致力于利用可视化的显微镜分析染色体的完整性除了非整倍体，染色体微缺失、重复、扩增和等基因组DNA失衡是导致胎儿发育迟缓、畸形、死胎、流产和其他先天性疾病的内在原因局限性材料受限，需要新鲜的组织、血样进行活细胞培养不能分辨长度在10Mb以下染色体片断的缺失、增加或易位染色体亚端粒区域异常诊断率较低荧光原位杂交技术（fluorescentin-situhybridization，FISH)FISH局限性只能对有限的位点进行检测FISH依赖于探针的设计，检测不明原因的病例难度较大对植入前胚胎的检测，缺乏覆盖全基因组检测的能力aCGH优势结合了基因芯片和传统CGH的优点更高的分辨率：G-显带的分辨率：10Mb传统CGH:5-10MbArrayCGH:100kb检测基因组的拷贝数变化，可对染色体非整倍体、微缺失或微重复或其他不平衡的染色体异常检测能够对染色体异常进行精确定位结合全基因扩增技术，可以进行胚胎全染色体组的检测------PGS/PGD截止2011年，智力低下的arrayCGH研究论文就达4370篇CMA技术平台CMA产前诊断适应人群希望更全面、更准确的了解胎儿染色体情况，以排除出生缺陷的可能性（生长发育迟缓，智力低下、自闭症等原因）胎儿B超检查发现结构异常，但染色体核型分析正常者羊水染色体核型分析已发现异常，但无法确定异常染色体的确切位置或来源者胎儿发现新发的染色体相互易位，需进一步排除微缺失者CMA检测先天性疾病的适应症不同程度的智力低下生长发育迟缓、语言发育迟缓面容异常内脏器官（如心脏、肾脏、生殖器）畸形认知/精神/行为问题（如多动症、自闭症）截止12年10月，共收病人233例

植入前诊断病例7例

难免流产流产物分析121例

产前诊断病例50例

产后先天性疾病诊断55例检测标本活检的单个卵裂球绒毛引产胎儿组织羊水脐血外周血检测主要试剂用QIAampDNAMiniKit(QIAGEN)提取纯化DNABluegnomeCytoChipFocusConstitutional芯片AffymetrixCytoScanHDSNP6.0ReferenceDNA:NormalPromegaMaleNormalAsianMale后续验证主要方法MLPAFISHPCR初步总结植入前诊断病例6例病人，共32个胚胎进行了arrayCGH检测其中2例患者的所有胚胎检测结果异常，未获得可移植的正常胚胎4例患者得到可移植的胚胎，2例获得成功妊娠，目前已孕30周，继续妊娠中。产前诊断病例核型含衍生染色体的羊水标本全部检出染色体的异常来源死胎或胚胎停育病例中46.9%检出了染色体拷贝数增加/减少，含16,15,21，22,18号等染色体的非整倍体，染色体拷贝数增加的片段包括4q13.2-q35.2，5p15.33，5p13.33，10q11.21，19p13.3-p13.2等，。B超诊断结构异常引产胎儿组织30.4%可检出有临床意义的染色体微缺失或微重复，其中大部分为常规染色体核型分析不易检出的病例产后病例37.1%检出有临床意义的染色体微缺失、微重复，检出拷贝数减少的染色体片段包括15q11.2，15q13.1，5p15.33-p4.3，11p11.2，5q11.2，16q23.3等多重连接探针扩增技术(MLPA)Chromosomalarrayoffersamuchhigherdiagnosticyield(15%-20%)forgenetictestingofindividualswithunexplaineddevelopmentaldelay/intellectualdisabilities,autismormultiplecongenitalanomaliesthanG-bandedkaryotypingandhas,