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第二章一般检验
第三节一般检验基本技术
一、静脉、皮肤采血法
临床血液检验根据检验方法、目的、标本量,可采用皮肤采血法(末梢桌血法)、静脉采血法和动脉采血法。动脉采血法由于其风险性较高,在临床上较少使用。
(一)静脉采血法
凡位于体表的浅静脉均可作为静脉采血部位,通常采用肘部静脉,也可采用手背部、手腕部和外踝部静脉。幼儿可采用颈外静脉采血,必要时还可以从股静脉、大隐静脉及锁骨下静脉采血。目前真空定量采血法已在临床普遍应用。
1.采血步骤
(1)项目要求,准备好相应的采血器材。
(2)患者取卧位或坐位,手臂伸直平放在床边或台面垫枕上,暴露穿刺部位。
(3)找好采血静脉后,先用碘酊棉签从内向外顺时针方向消毒穿刺处皮肤,稍等片刻再用75%(v/v)的乙醇棉签以同样方式消毒并擦去碘迹。在采血部位的上方扎压脉带,嘱患者紧握拳头,使静脉显露。
(4)操作者以左手拇指固定静脉穿刺部位的下端,右手持注射器或真空穿刺用具,使针头斜面和针筒刻度向上(如属真空定量采血试管可不顾及此),先从约与皮肤成30。角的位置迅速刺破皮肤,然后适当降低角度穿破静脉壁进入静脉腔中,见回血后,将针头顺势深入少许,以免采血时针头滑出,但不可用力深刺,以免穿破静脉造成血肿。
(5)用右手食指将针头固定,左手缓缓抽动注射器内芯,至所需血量后(真空定量采血试管收集到量后),解开压脉带,嘱患者松拳,用无菌干棉球(签)压住伤I=I,拔出针头。
(6)取下针头,将血液沿管壁缓缓注入容器中,防止产生泡沫。如果需要全血或血浆,则将血液注入事先准备好的抗凝管中,轻轻混匀,防止凝固。
2.真空采血
目前已在临床广泛使用,是今后静脉采血法的发展方向。其原理是封闭的试管内有定量的负压,使血液定量进入试管内,根据血量或检查项目只需更换负压试管可连续采血。
真空采血的优点:
(1)血样无容器之间的转移,减少了溶血现象而有效保护血液有形成分。
(2)采血量准确,采血量无限制。
(3)封闭式血标本转运方便,能避免对医护人员的感染和患者血标本间的交叉污染。
(二)皮肤采血法
皮肤采血法主要用于需血量微小的检查项目。所获得的末梢血不单纯是毛细血管血,实际是是微动脉、微静脉和毛细血管的混合血,并依采血时挤压的力度不同含有少量细胞间质和细胞内液。皮肤采血多选择手指指端或耳垂作为采血部位。世界卫生组织(wHO)推荐采取左手无名指或中指指端内侧。婴幼儿可采用脚大躅趾或足跟部位采血。严重烧伤患者,应选择皮肤完整处采血。
1.皮肤采血步骤
首先用手指轻轻按摩采血部位,使中指或无名指尖自然充血,再用体积比为75%(v/v)乙醇棉球消毒局部皮肤,待乙醇挥发后,用左手拇指和食指适度捏紧刺血部位,右手持消毒采血针,自指尖内侧迅速刺人2~3mm,以稍加挤压血液能流出为宜。切忌用力挤压,以免混入大量组织液,使血液稀释。
采血针要用特制三棱针或一次性专用“采血针”,必须严格实行一人一针一管(毛细吸管)。
2.激光无痛采指血仪
目前激光无痛采指血仪已在临床使用,其原理是激光发生器发出一束单脉冲激光束,被照射的手指皮肤在很短的时间内高温使皮肤组织熔解、挥发,形成一小孔。激光无痛采指血仪无痛。还可避免组织液渗入,保证了检验结果的准确性。
二、血涂片制备
(一)载玻片的准备
新载玻片常带有游离碱质,需用浓度为1mol/L的HCl浸泡24小时,再用清水彻底冲洗,干燥后备用。旧载玻片要在含洗涤剂的水中煮沸20分钟,洗掉血膜,再用水反复冲洗,最后用95%(v/v)乙醇浸泡1小时,干燥备用。要保持玻片清洁、干燥、中性、无油腻。
(二)血涂片制作方法
取血液标本一滴置载玻片的一端,以边缘平滑的推片一端,从血滴前沿接触血液,使血液沿推片散开,推片与载玻片保持30。~45。夹角,平稳地向前推动,血液即在载玻片上形成薄层血膜。
涂片的厚薄与血滴大小、推片与载玻片之间的角度、推片时的速度及血细胞比容有关。血滴大、角度大、速度快则血膜厚;反之则血膜薄。一张良好的血涂片,要求厚薄适宜,头体尾明显,细胞分布均匀,血膜边缘整齐并留有空隙。
三、瑞氏染色法
瑞氏染色法是临床常用的血细胞染色法,特点是将固定和染色合并在一起进行,手续简便,染色时间短,对白细胞特异性颗粒着色较好,但对核的着色略差。
(一)瑞氏染料
由酸性染料伊红和碱性染料美蓝组成的复合染料。伊红为钠盐,有色部分为阴离子。美蓝为氯盐,有色部分为阳离子。美蓝和伊红的水溶液混合后,产生一种不溶于水的伊红化美蓝(ME)中性沉淀,即瑞氏染料,溶解于甲醇中,即成为瑞氏染液。甲醇
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