蛋白溶解度测定.pdfVIP

蛋白溶解度测定

1、大豆及其制品蛋白质溶解度测定

1范围

本标准规定了大豆及其制品中蛋白质溶解度测定的原理、试剂、仪器设备和测

定方法。

本标准适用于饲料检测单位、饲料企业、养殖场(户)、大中专院校对大豆及其

制品的加工质量的检测和监控。

2规范性引用文件

下列文件通过本标准的引用而成为本标准的条款。凡是注日期的引用文件，其

随后所有的修改单(不包括勘误的内容)或修订版均不适用于本标准，然而，鼓励根

据本标准达成协议的各方研究是否可使用这些文件的必威体育精装版版本。凡是不注明日期的

引用文件，其必威体育精装版版本适用于本标准。

GB601—88化学试剂滴定分析(容量分析)用标准溶液的制备GB/T6432—

1994饲料中粗蛋白质的测定

3术语和定义

下列术语和定义适用于本标准。

3.1蛋白质溶解度

在一定的氢氧化钾溶液中溶解的蛋白质质量占试样中总蛋白质量的百分数。通

常采用氮溶解指数(NSI)和蛋白质分散指数((PDI)来表示。

4原理

用一定浓度的氢氧化钾溶液提取试样中的可溶性蛋白质，在催化剂作

用下用浓硫酸将提取液中可溶性蛋白质的氮转化为硫酸铵。加入强碱进行蒸馏

使氨逸出，用硼酸吸收后，再用盐酸滴定测出试样中可溶性蛋白质含量;同时，测

定原始试样中粗蛋白质含量，计算出试样的蛋白溶解度。

5试剂

a)氢氧化钾(分析纯)，无水硫酸钾、五水硫酸铜、氢氧化钠、硼酸、甲基

红、溴甲酚绿、硫酸铵;

b)浓硫酸、盐酸(分析纯)、95%乙醇、蒸馏水。

6仪器和设备

a)感量为0.0001g分析天平;

b)磁力搅拌器;

c)离心机;

d)样品粉碎机;

e)60目分析筛;

f)电炉;

g)100mL或250mL凯氏烧瓶;

h)凯氏蒸馏装置;

i)250mL锥形瓶;

j)1000mL容量瓶;

k)微量滴定管。

7分析步骤

7.1试剂

7.1.10.042M氢氧化钾溶液

称取2.360g氢氧化钾，加水溶解后，转移至1000mL容量瓶中，用水定容至

刻度。

7.1.2混合催化剂

称取6g硫酸钾和0.4g硫酸铜，磨碎混匀。

7.1.3氢氧化钠溶液

称取400g氢氧化钠，加水溶解后，转移至1000mL容量瓶中，用水定容至刻

度。

7.1.4硼酸溶液

称取20g硼酸，加水溶解后，转移至1000mL容量瓶中，用水定容至刻度。

7.1.50.1M盐酸标准溶液

量取8.3mL浓盐酸，注入1000mL水中混匀，按GB601-88要求进行标定即

可。

7.1.6混合指示剂

称取1g甲基红和5g溴甲酚绿，加入乙醇溶解后，转移至1000mL容量瓶

中，用乙醇定容至刻度。

7.2样品制备

取具有代表性的试样用四分法缩减至200g，粉碎至60目，装入密封容器中。

7.3操作步骤

7.3.1试样处理

称取试样1.0g(准确至0.0002g)置于250mL烧杯中，准确移入0.042M氢

氧化钾溶液50mL，磁力搅拌20min，然后将试样转移至离心管中，以2700

r/min的速度离心10min。

7.3.2测定

吸取上清液15mL,放入消化管中,按照GB/T6432-1994凯氏定氮法测定试

样中可溶性蛋白质的含量。同时，按照GB/T6432-1994凯氏定氮法测定试样中粗

蛋白质的含量。

7.3.3分析结果计算

试样中蛋白质溶解度按照下式进行计算:

(1)

式中:

C——盐酸标准溶液浓度，mol/L;

V2——滴定试样时所需标准酸溶液体积(mL);

V1——滴定空白时所需标准酸溶液体积(mL);

Vcent;——吸取样液体积(mL);

V——试样分解液蒸馏用体积(mL)。

7.3.4重复性

7.3.4.1每个样品应取