免疫组化试题参考答案.pdf

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让知识带有温度。

免疫组化试题参考答案

免疫组织化学试题参考答案一、名词解释:

1.PAS反应:即过碘酸--雪夫反应显示糖原,简称PAS反应。其

原理是通过利用过碘酸的氧化作用,使糖分子中的二醇基氧化为二醛

基,释放出醛基,与碱性品红反应,生成紫红色化合物沉淀。

2.Feulgen法:即福尔根反应显示DNA法。其原理是组织用1NHCl

60℃水解,将DNA分子中脱氧核糖核酸与嘌呤间的连链打开,使之

释放出醛基与碱性品红发生反应,生成紫红色化合物沉淀。

3.PAP法:即过氧化物酶一抗过氧化物酶法,该技术原理与其他

免疫定位技术相同,即通过抗体使标记分子(抗辣根过氧化物酶)定

位于抗原附件。其不同点为三步法,且有放大作用,反应彻低依靠于

免疫学结合,不需要标记任何抗体,反应敏捷度高,背景低。注重一

抗与复合物中的抗体必需来源于同一种动物,且二抗必需过剩。

4.核酸探针:指能与特定核酸序列发生特异性互补的已知标记的

核酸片段,可检测待测样品中特定的基因序列。无标记的探针称裸探

针。

5.核酸分子杂交:指具有互补序列的两条核酸单链在一定条件下

按碱基配对原则形成双链的过程。杂交的双方分离为待测的核酸序列

和已知核酸序列,后者通常用核素或非核素示踪标记,称为探针

(probe),杂交后形成的异源双链分子称为杂交分子。

6.质量控制:指组织化学反应各环节中获得最佳效果的技术掌握,

是组织化学的关键环节,是取得惬意效果的须要条件,是提高结果可

信度的根本保证。

7.诱发荧光:组织细胞中的某些物质本身不发荧光,但在经过一

定的化学反应后可以改变成荧光分子。此技术目前主要应用在生物胺

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千里之行,始于足下

的显示中。其中最重要的是甲醛和乙醛酸诱发多巴胺、去甲肾上腺素、

肾上腺素和5—羟色胺荧光,以及邻苯二醛诱发组织胺荧光的反应。

8.定量分析:定量推断是结果推断中最重要也是具故意义的推断,

其推断结果有助于统计学的分析处理。组织细胞化学结果的定量分析

又称定量组织细胞化学,指在组织细胞化学阳性结果的基础上,对阳

性结果(终于阳性产物)举行测量,以数值反应被检测物质的含量。

此法是阳性结果的进一步检测和分析,越发直观地反应试验结果,更

有力地说明试验结果。常用有人工定量分析与仪器定量分析两类。

9.固定:为了更好的保持细胞和组织原有的形态结构,防止组织

自溶,有须要对细胞和组织举行固定,其作用不仅是使细胞内蛋白质

凝固,终止或抵制外源性和内源性酶活性,更重要的是最大限度的保

存细胞和组织的抗原性,使水溶性抗原改变为非水溶性抗原,防止抗

原弥散。

10.组织化学:指在形态学基础上讨论组织或细胞中物质的化学

成分和活性,并举行定性、定位、定量及其代谢状态的学科。其目的

是联系形态、化学万分和功能来了解组织或细胞的代谢变化。

11.ABC法:即亲和素-生物素-过氧化物酶复合物

法,其基本原理是在抗生物素和生物素之间形成共价和不行逆的

结合,通过抗生物素在辣根过氧化物酶和其次抗体之间建立生物素桥

联,使酶定位于所需测定的特异性抗体周围。其优点在于易于找到合

适的其次抗体。

12.细胞骨架:指细胞内的结构网架,由一些细丝成分组成,包

括微丝、微管、中间丝和微梁网格。

二、问答题

1.简述酶组织化学的基本原理。

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让知识带有温度。

答:在酶组织细胞化学办法中,从原理上讲,可分为两在类型。

一类是酶是活性——酶组织细胞化学办法,属于普通组织细胞化学办

法。一类是酶蛋白质的存在及存在的部位——免疫酶组织细胞化学办

法,属于免疫组织细胞化学的内容。目前,通常是将两者结合起来,

即显示酶活性,又酶蛋白的存在、分布及代谢状况。

2.用箭头表示免疫电镜技术(包埋前法)的过程。答:包埋前法

有用于酶标法和PAP法。详细过程如下:取材→→固定→→冰冻切

片(40~150μm)→→免疫染色(同酶标法和PAP法)→→挑选阳性

部位,在解剖显微镜下,取下阳性部位,裱于盖玻片上→→1%的锇

酸固定,1~1.5h→→脱水→→平板包埋聚合→→修块、超薄切片

(50~80nm)、裱于铜网→→重金属盐双重染色→→电镜观看、记

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