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分子生物学在水产方面的应用研究--第1页

分子生物学在水产方面的应用研究

摘要:近年来,分子生物学在科学研究领域中影响广泛且最具活力,其对水产动物产生的影

响也越来越深远。对分子生物学技术在水产动物中的应用,如实时荧光定量PCR技术、转

基因技术、DNA指纹图谱技术、核酸杂交技术、SCAR分子标记技术等,在促进水产动物

的生长、增强水产动物的抗病力、培育优良品种及生产新品系等方面进行了综述,并阐述了

其在水产养殖中的潜在影响。

关键词:实时荧光定量PCR、转基因、DNA指纹图谱

近年来,分子生物学在科学研究领域中影响广泛且最具活力,不仅在动物、植物和微生

物等各生物学基础学科,而且在食品、农业、环境领域内很多应用学科的科研中都渗透着分

子生物学的知识和技术。

在中国,水产养殖业经过多年的发展,已经成为举足轻重的产业。但总有一股声音反对

水产养殖,他们认为水产养殖会威胁食品安全,会威胁环境安全,会威胁野生鱼类资源。有

国外学者认为要恢复原来的粗养、生态水产养殖模式。追根究底,水产科学技术的相对落后

成了制约其进一步增长的重要因素。要彻底摆脱水产技术与生产的不平衡性,大力发展水产

业的高新技术是至关重要的。其中,分子生物学对解决水产业的技术难题、开创新的领域、

改造产业的传统模式起着十分重要的作用。许多国家都在大力研发与水产业有关的分子生物

学技术,着力于开发新的优良养殖种类、培育高产抗逆的良种以及探寻检测和防治病害的新

技术新方法等。因此应用分子生物学技术进行水产养殖品种的改良和疾病的预防很有发展潜

力。现就分子生物学技术在水产动物中的应用简要介绍。

1实时荧光定量PCR技术

所谓实时荧光定量PCR,是指在PCR反应体系中加入荧光基团,利用荧光信号累积实

时监测整个PCR进程,最后通过标准曲线或其他方法对未知模板进行相对或绝对定量分析

的方法。主要有两种类型:SYBRGreenⅠ和TaqMan探针目前,国内许多研究人员通过实时

荧光定量PCR技术对水产动物病害研究进行了大量的尝试。徐淑菲等人建立了传染性鲑鱼

贫血病的SYBRGreenⅠ实时荧光定量PCR技术,其灵敏度比传统PCR高1000倍,为我国

的水产品检疫工作带来极大的便利。岳志芹等建立了Taqman实时荧光定量PCR方法检测传

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染性造血器官坏死病毒,可以在短时间内同时对大量样品进行定量检测,非常适合鱼类病毒

的快速检验检疫。真鲷虹彩病毒一直被世界动物卫生组织列入必报疫病病原目录,张旻等为

了快速检测该病原,建立了真鲷虹彩病毒实时荧光定量PCR检测方法,经试验,检测限最

低可达100拷贝数,而且与流行性造血器官坏死病毒、甲鱼虹彩病毒等6种水生动物病毒无

交叉反应。草鱼的呼肠孤病毒和大口黑鲈溃疡综合征病毒等的荧光定量PCR检测也已成功

建立,这些均为我国的鱼类病毒病的快速诊断与病毒病原定量检测有重要意义。

国外也有诸多采用不同类型的实时荧光定量PCR对鱼类病毒进行检测分析的研究报

道。DallaValleL等根据该病毒的保守序列设计了2对引物探针,用SYBRGreenⅠ荧光定量

PCR对β野田村病毒进行了检测和定量分析。SnowM等应用Taqman探针对传染性鲑出血病

病毒进行了检测分析。WangXW等采用分子信标对大黄鱼的虹彩病毒进行了检测定量分析。

BowersRM等和DharAK等分别对虹鳟传染性胰坏死病毒和传染性造血组织坏死病毒进行

了定性和定量分析,他们均采用的是SYBRGreenⅠ荧光定量PCR。以上的研究提示实时

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