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动物肝脏中DNA的提取及检测

一、前言

脱氧核糖核酸

脱氧核糖核酸（DNA，为英文Deoxyribonucleic?acid的缩写），又称去氧核

糖核酸，是脱氧核糖核酸染色体的主要化学成分，同时也是组成基因的材料。有时

也被称为“遗传微粒”，原因是在繁殖过程中，父代会把它们自己DNA的一部分复

制传递到子代中，从而完成性状的传播。

DNA是高分子聚合物，DNA溶液为高分子溶液，具有很高的粘度，可被甲基绿

染成绿色。DNA对紫外线（260nm）有吸收作用，利用这一特性，可以对DNA进

行含量测定。当核酸变性时，吸光度升高，称为增色效应；当变性核酸重新复性时，

吸光度又会恢复到原来的水平。较高温度、有机溶剂、酸碱试剂、尿素、酰胺等都

可以引起DNA分子变性，即DNA双链碱基间的氢键断裂，双螺旋结构解开—也称

为DNA的解螺旋。

在细胞内，DNA能与蛋白质结合形成染色体，整组染色体则统称为染色体组。

对于人类而言，正常的体细中含有46条染色体。染色体在细胞分裂之前会先在分裂

间期完成复制，细胞分裂间期又可划分为：G1期-DNA合成前期、S期-DNA合成

期、G2-DNA合成后期。对于真核生物，如动物、植物及真菌而言，染色体主要存

在于细胞核内；而对于原核生物，如细菌而言，则主要存在于细胞质中的拟核内。

染色体上的染色质蛋白，如组织蛋白，能够将DNA进行组织并压缩，以帮助DNA

与其他蛋白质进行交互作用，进而调节基因的转录。

脱氧核糖核酸的结构

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DNA的结构：DNA的结构一般可划分为一级结构、二级结构、三级结构和四

级结构四个水平。

DNA是一种长链聚合物，组成单位为四种脱氧核苷酸，即腺嘌呤脱氧核苷酸

（dAMP脱氧腺苷）、胸腺嘧啶脱氧核苷酸（dTMP脱氧胸苷）、胞嘧啶脱氧核苷

酸（dCMP脱氧胞苷）、鸟嘌呤脱氧核苷酸（dGMP脱氧鸟苷）。而脱氧核糖（五

碳糖）与磷酸分子借由酯键相连，组成其长链骨架，排列在外侧，四种碱基排列在

内侧。每个糖分子都与四种碱基里的其中一种相连，这些碱基沿着DNA长链所排列

而成的序列，可组成遗传密码，指导蛋白质的合成。读取密码的过程称为转录，是

以DNA双链中的一条单链为模板转录出一段称为mRNA（信使RNA）的核酸分子。

DNA是由许多脱氧核苷酸按一定碱基顺序彼此用3’，5’-磷酸二酯键相连构

成的长链。大多数DNA含有两条这样的长链，也有的DNA为单链，如大肠杆菌噬

菌体φX174、G4、M13等。DNA有环形DNA和链状DNA之分。在某些类型的

DNA中，5-甲基胞嘧啶可在一定限度内取代胞嘧啶，其中小麦胚DNA的5-甲基胞

嘧啶特别丰富。在某些噬菌体中，5-羟甲基胞嘧啶取代了胞嘧啶。40年代后期，查

加夫（E.Chargaff）发现不同物种DNA的碱基组成不同，但其中的腺嘌呤数等于其

胸腺嘧啶数（A=T），鸟嘌呤数等于胞嘧啶数（G=C），因而嘌呤数之和等于嘧啶

数之和，一般用几个层次描绘DNA的结构。

浓盐法从动物组织中提取DNA

核酸和蛋白质在生物体中常以核蛋白（DNP/RNP）的形式存在，其中DNP能

溶于水及高浓度盐溶液，但在0.14M的盐溶液中溶解度很低，而RNP则可溶于低

盐溶液，因此可利用不同浓度的NaCl溶液将其从样品中分别抽提出来。将抽提得到

的DNP用SDS处理可将其分离DNA和蛋白质，用氯仿-异戊醇将蛋白质沉淀除去

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可得DNA上清，加入冷乙醇即可将其呈纤维状析出。

肝脏细胞

肝脏是由肝细胞组成，肝细胞极小，肉眼看不到，必须