考点2--细胞工程.ppt

动物细胞工程常用的技术手段动物细胞培养动物细胞融合单克隆抗体核移植动物细胞培养植物组织培养和动物细胞培养的比较应用：生产蛋白质生物制品检测有毒物质（许多致畸、致癌物质加入培养液后，培养细胞会发生染色体结构和数目的变异。根据变异细胞占全部培养细胞的百分数，可以判断某种物质的毒性。）为烧伤病人植皮利用动物细胞培养技术中细胞的贴壁生长和接触抑制特点，可以用烧伤病人自己的健康皮肤细胞培养出大量的自身薄层皮肤细胞供植皮所需。用于科学研究（生理、病理、药理）动物细胞融合单克隆抗体（1）为什么选用小鼠骨髓瘤细胞与B淋巴细胞融合? 小鼠骨髓瘤细胞可以在体外培养条件下大量增殖，B淋巴细胞能够产生抗体，细胞的同源性越近，融合形成的杂种细胞越易成活。（2）骨髓瘤细胞是癌细胞吗? 有无限增殖能力（失去凋亡机制，失去接触抑制等）的细胞是肿瘤细胞，而具有转移能力的肿瘤细胞，称为癌细胞，所以说，瘤细胞不能等于癌细胞。单克隆抗体（3）整个制备过程为何要经过两次筛选? 第一次筛选得到杂交瘤细胞（多种），第二次需先在多孔培养板上，在每孔只有一个杂交瘤细胞的情况下开始培养，然后再筛选出能产生特异性抗体的细胞群。由于该细胞群是单个杂交瘤细胞克隆得来的，所以产生的抗体必然是化学性质单一的，特异性强的单克隆抗体。这里的单克隆确有单个细胞克隆的含义，只不过克隆的不是B淋巴细胞，而是杂交瘤细胞。）核移植***考点2.细胞工程知识点:1.植物的组织培养Ⅱ(植物细胞的全能性、植物组织培养、植物体细胞杂交）2.动物的细胞培养与体细胞克隆I3.细胞融合与单克隆抗体Ⅱ主要技术植物组织培养植物体细胞杂交动物细胞培养动物细胞融合单克隆抗体技术核移植植物细胞工程技术动物细胞工程技术操作水平：目的：细胞水平或细胞器水平按照人们意愿来改变细胞内的遗传物质或获得细胞产品分类：植物细胞工程动物细胞工程解读细胞工程的概念：操作对象：植物细胞或动物细胞（植物细胞器或动物细胞器）细胞分化所有细胞含全套基因但表达的基因不同------分化的根本原因于是转录的mRNA不同翻译成的蛋白质不同------分化的直接原因导致细胞的形态、结构、功能不同特点：稳定性、不可逆性、持久性结果：不同形态结构功能的细胞——形成组织细胞的全能性定义：原因：大小：生物体的细胞，具有使后代细胞发育成完整个体的潜能。生物的每一个细胞都含有该物种特有的全套遗传物质。受精卵＞生殖细胞＞体细胞植物细胞＞动物细胞分化程度低的细胞＞分化程度高的细胞问题：1.生物体内的细胞为什么没有表现出全能性，而是分化成不同的组织器官？在特定的时间和空间条件下，基因选择性的表达的结果。2.表现全能性的条件有哪些？离体提供营养物质激素其它适宜条件：细胞离体、含有全部营养成分的培养基、一定的温度、空气、无菌环境、适合的PH、适时光照等。必要条件：(高度分化)(疏松、液泡化、薄壁)植物组织培养的过程离体的组织、器官、细胞愈伤组织根、芽（胚状体）植物体加激素等脱分化再分化加营养、激素等理论基础细胞的全能性◆脱分化的实质和结果分别是什么？实质:恢复细胞的全能性过程。结果:形成愈伤组织。◆决定植物脱分化、再分化的关键因素是什么？植物激素细胞分裂素/生长素这个比值大时，便于长芽这个比值小时，便于生根组培应用生产植物的代谢产物（细胞产物的工厂化生产）培养终点？快速繁殖无病毒植株（脱毒植物）培养终点？生产人工种子培养终点？微型繁殖（快速繁殖）培养终点？愈伤组织植物体胚状体植物体人工种子自然种子胚状体人工种皮人工胚乳胚种皮胚乳组培应用微型繁殖（快速繁殖）培养终点？植物体2.保持母本的优良性状植物组织培养属于无性生殖是体细胞培育优点：1.快速繁殖注意：3.大规模培养组培应用单倍体育种培养终点？突变体的利用培养终点？植物体植物体原理：植物组织培养的细胞一直处于不断的分生状态，容易发生突变原因：染色体变异过程：单倍体成熟植物体花药离体培养秋水仙素处理纯合体生姜是药食两用的经济作物，具有栽培容易、产量高、价格高等特点，近年在各地发展很快。但是生姜在生产上长期采用无性繁殖，容易感染多种病毒病，使生姜品质变差，叶子皱缩，生长缓慢，一般减产30%～50%。写出培育流程图紫草紫草素