高一实验二还原糖、脂肪、蛋白质的鉴定.pdf

高一生物实验二生物组织中还原糖、脂肪、蛋白质的鉴

定

实验点拨

1、生物学中物质的鉴定与化学中物质的鉴定,其原理是一致的。化学中被鉴定的物质与

所用的化学试剂要么发生颜色反应,要么产生沉淀,在生物学中物质鉴定的理念是:某些化

学试剂能够使生物组织中的有关有机化合物产生特定的颜色反应.

①可溶性还原糖+斐林试剂→砖红色沉淀.(水浴加热)

②脂肪小颗粒+苏丹Ⅲ染液→橘黄色小颗粒.(要显微镜观察)

③蛋白质+双缩脲试剂→紫色反应.(要先加A液NaOH溶液再加B液CuSO4溶液)

2、可溶性还原糖的鉴定实验中：应选择含糖量较高,颜色为白色或近白色的植物组织。

以苹果,梨为最好。且先要制备组织样液。研磨时，可加石英砂和水一起研磨。

3、斐林试剂要两液混合均匀且现配现用，切勿将甲液和乙液分别加入组织样液中。

斐林试剂的配制过程示意:

斐林试剂甲液(0.1g/ml的NaOH溶液)

斐林试剂乙液(0.05g/ml的CuSO4溶液)

4.关于鉴定还原糖的实验，在加热试管中的溶液时，应该用试管夹夹住试管上部，并放

入盛开水的大烧杯中加热。注意试管底部不要接触烧杯底部，同时试管口不要朝向实验者，

以免试管内溶液沸腾时冲出试管，造成烫伤。如果试管内溶液过于沸腾，可以上提试管夹，

使试管底部离开大烧杯中的开水。

5.做鉴定还原糖的实验时，在鉴定之前，可以留出一部分样液，以便与鉴定后的样液的

颜色变化作对比，这样可以增强说服力。

6、脂肪的鉴定实验中：实验材料应选择富含脂肪的种子,以花生种子为最好。实验前浸

泡3h～4h（浸泡时间太短，不容易切片；浸泡时间过长，组织太软，切下来的薄片不易成

形），最适宜切片。

7、实验中学生应分工合作。在“还原糖的鉴定”实验中，当每组两个学生中的一个制

备生物组织样液时，另一个学生可以用酒精灯将水煮开，以便缩短实验的等待时间。在“脂

肪的鉴定”实验中，一个学生制作临时装片时，另一个学生则可以调试显微镜。另外，在完

成前两个实验时，一个学生洗刷试管、清洗玻片和整理显微镜，另一个学生则可以进行后一

个实验的操作。

8、蛋白质的鉴定实验：可用浸泡1d～2d的黄豆种子(或用豆浆,或用鸡蛋蛋白稀释液).

9、双缩脲试剂的使用,一定要先加入A液(即0.1g/ml的NaOH溶液),再加入双缩脲试

剂B液(即0.01g/ml的CuSO4溶液).

10、还可设计一只加底物的试管,不加双缩脲试剂,进行空白对照,说明颜色反应的引起

是蛋白质的存在与双缩脲试剂发生反应,而不是空气的氧化引起.

实验报告

［提出问题］

1、怎样鉴定生物组织中的还原糖？斐林试剂怎样配制和使用？

选材；制备组织样液；取组织样液；加斐林试剂(由斐林试剂甲液和乙液充分混合而

成,不能分别加入)；水浴加热；观察溶液颜色变化：浅蓝色→棕色→砖红色.

结论:还原糖与斐林试剂在加热煮沸的过程中生成砖红色沉淀

2、脂肪的鉴定实验中，如何观察？若有脂肪，可观察到什么现象？

取材；切片；滴苏丹Ⅲ染液染色、去浮色、制成临时装片；

观察：先在低倍镜下,找到材料的脂肪滴,然后,转为高倍镜观察.

结论：细胞中的圆形脂肪小颗粒已经被染成橘黄色.

3、蛋白质的鉴定使用什么试剂？与斐林试剂相比有哪些相同点和不同点？

双缩脲试剂；斐林试剂和双缩脲试剂的比较

相同点:

①都由NaOH溶液和CuSO4溶液构成;

②斐林试剂甲液和双缩脲试剂A都为0.1g/mLNaOH溶液.

不同点:

①CuSO4溶液浓度不一样:斐林试剂乙液为0.05g/mLCuSO4溶液,双缩脲试剂B为

0.01g/mLCuSO4溶液.

②配制比例不一样.

③使用方法不一样:斐林试剂是甲,乙液一起混合后再使用,双缩脲试剂则是先向待鉴

定材料加入A试剂摇匀后,再加入试剂B.

④鉴定的对象不一样:斐林试剂鉴定的是还原糖,双缩脲试剂鉴定的是蛋白质.

⑤反应本质及颜色反应不一样.

［用品准备］

1.可溶性还原糖的鉴定实验:选择含糖量较高,颜色为白色或近白色的植物组织,以苹

果,梨