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原核生物与真核生物1/21
一、RNA聚合酶能直接开启RNA链合成RNA聚合酶由多个亚基组成原核生物RNA聚合酶原核生物转录起始2/21
关键酶全酶???????????3/21
二、RNA聚合酶结合到DNA开启子上起动转录转录是不连续、分区段进行。每一转录区段可视为一个转录单位,称为操纵子(operon)。操纵子包含若干个结构基因及其上游(upstream)调控序列。调控序列中开启子是RNA聚合酶全酶结合到模板DNA部位,也是控制转录关键部位。5?3?3?5?结构基因调控序列4/21
是RNA聚合酶结合并开启转录特异DNA序列。开启序列RNA转录起始-35区-10区TTGACATTAACTTTTACATATGATTTTACATATGTTTTGATATATAATCTGACGTACTGTN17N16N17N16N16N7N7N6N7N6AAAAAtrptRNATyrlacrecAAraBADTTGACATATAAT共有序列五种E.coli开启序列共有序列5/21
RNA聚合酶全酶在转录起始区结合:受保护DNA片段:40-60碱基对。6/21
2.DNA双链局部解开,形成开放转录复合体(opentranscriptioncomplex);1.RNA聚合酶全酶(?2????)与模板结合,形成闭合转录复合体(closedtranscriptioncomplex);3.在RNA聚合酶作用下发生第一次聚合反应,形成转录起始复合物:RNApol(?2????)-DNA-pppGpN-OH3?转录起始复合物:5?-pppG-OH+NTP?5?-pppGpN-OH3?+ppi三、转录起始过程:7/21
E.coli转录起始和延长8/21
第一个磷酸二酯键生成后,σ亚基即从转录起始复合物上脱落,关键酶连同四磷酸二核苷酸,继续结合于DNA模板上,酶沿DNA链前移,进入延长阶段。9/21
一、转录起始需要开启子、RNA聚合酶和转录因子参加真核生物转录起始1.转录起始前上游区段含有开启子关键序列不一样物种、不一样细胞或不一样基因,转录起始点上游能够有不一样DNA序列,但这些序列都可统称为顺式作用元件(cis-actingelement)。顺式作用元件包含开启子、开启子上游元件等近端调控元件和增强子等远隔序列。10/21
起始点上游多数游共同TATA序列,称为TATA盒。通常认为这就是开启子关键序列。开启子上游元件是位于TATA盒上游DNA序列,多在转录起始点约-40~-100nt位置,比较常见是GC盒和CAAT盒。增强子是能够结合特意基因调整蛋白,促进邻近或远隔特定基因表示DNA序列。11/21
TATA盒CAAT盒GC盒增强子顺式作用元件结构基因-GCGC---CAAT---TATA转录起始真核生物开启子保守序列12/21
2.真核生物有三种DNA依赖性RNA聚合酶13/21
POL-ⅡTFⅡFⅡAⅡB由RNA-PolⅡ催化转录PICPOL-ⅡTFⅡFⅡHⅡETBPTAFTFⅡD-ⅡA-ⅡB-DNA复合物TATAⅡAⅡBTBPTAFTATAⅡHⅡECTD-PPIC组装完成,TFⅡH使CTD磷酸化14/21
真核生物酶特点真核生物RNA聚合酶结构比原核生物复杂,全部真核生物RNA聚合酶都有两个不一样大亚基和十几个小亚基.RNA聚合酶Ⅱ由十二个亚基组成,其最大亚基称为RBP1RNA聚合酶Ⅱ最大亚基羧基末端由一段为Tyr-Ser-Pro-Thr-Ser-Pro-Ser重复序列片段,称为羧基末端结构域。它对于维持细胞活性是必须。15/21
3.转录因子能直接、间接识别和结合转录上游区段DNA蛋白质,现已发觉数百种,统称为反式作用因子(trans-actingfactors)。反式作用因子中,直接或间接结合RNA聚合酶,则称为转录因子(transcriptionalfactors,TF)。16/21
真核生物RNA-pol不与DNA分子直接结合,而需依靠众多转录因子,形成转录起始复合物(pre-initiationcomplex,PIC)。PolⅡTFⅡHTAFTFⅡFTAFTAFTFⅡATFⅡBTBPDNATATAEBPTBP17/21
当合成一段含有60~70个核苷酸RNA时,TFⅡE和TFⅡH释放,RNA聚合酶Ⅱ进入转录延长久。18/21
综上,原核生物与真核生物转录起始调控差异主要有:原核生物聚合酶仅有一个,有多个亚基。
真核生物有三种DNA依赖性RNA聚合酶,有两个不一样大亚基和十几个不一样小亚基。原核生物RNA聚合酶可直接结合DNA模板,而真核生物RNA聚合酶需与辅助因
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