DB34T 3991-2021 禽蛋中替米考星残留的测定 高效液相色谱法.docxVIP

ICS67.050CCSX04

34

安徽省地方标准

DB34/T3991—2021

禽蛋中替米考星残留的测定高效液相色

谱法

Determinationoftilmicosinresiduesinegg-highperformanceliquidchromatography

2021-09-03发布2021-10-03实施

安徽省市场监督管理局发布

I

DB34/T3991—2021

前言

本文件按照GB/T1.1—2020《标准化工作导则第1部分：标准化文件的结构和起草规则》的规定

起草。

请注意本文件的某些内容可能涉及专利。本文件的发布机构不承担识别专利的责任。本文件由安徽省兽药饲料监察所提出。

本文件由安徽省农业农村厅归口。

本文件起草单位：安徽安丰堂动物药业有限公司、安徽省兽药饲料监察所、利辛县双飞养殖专业合作社、安徽省动物卫生监督所、安徽省动物疫病预防与控制中心、安徽省农科院畜牧兽医研究所、桐城市畜牧兽医管理中心、宣州区畜牧兽医管理局。

本文件主要起草人：张莉、刘红云、张士卿、苗文萍、章天霞、蔡一杰、郑举、吴蕾、李珲、王雨霜、刘文文、王群、马瑞钰、丁常宏、杜腾飞。

1

DB34/T3991—2021

禽蛋中替米考星残留的测定高效液相色谱法

1范围

本文件规定了禽蛋中替米考星残留检测的试样制备及高效液相检测方法。本文件适用于禽蛋中替米考星的残留测定。

2规范性引用文件

下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款。其中，注日期的引用文件，仅该日期对应的版本适用于本文件；不注日期的引用文件，其必威体育精装版版本（包括所有的修改单）适用于本文件。

GB/T6682分析实验室用水规格和试验方法3术语和定义

本文件没有需要界定的术语和定义。

4原理

试样中的替米考星加乙腈经涡旋匀浆后离心取上清液，正己烷液液分配去脂，固相萃取柱净化，旋转蒸发浓缩，经色谱柱梯度洗脱分离，用紫外检测器检测，以保留时间进行定性，外标法定量。

5试剂和材料

5.1用水符合GB/T6682中一级用水的规定。5.2甲醇：色谱纯。

5.3乙腈：色谱纯。

5.4正己烷：分析纯。

5.5无水硫酸钠：分析纯。5.6磷酸：分析纯。

5.7二丁胺：分析纯。

5.8氢氧化钠：分析纯。

5.9替米考星对照品：≥95.0％。

5.10固相萃取柱：HLB（6mL，200mg）或同等柱效。

5.11替米考星标准溶液的制备：取替米考星对照品25.0mg，精密称定，置25mL容量瓶中，加乙腈制成每1mL中含1mg的溶液，精密量取5mL，置25mL量瓶中，用磷酸溶液稀释至刻度，摇匀，制成0.2mg/mL的标准储备液。在试验中用磷酸溶液配置成不同浓度的标准工作液，现配现用。

2

DB34/T3991—2021

5.12磷酸溶液的配制：取水900mL，加磷酸5.71g，用12.5mol/L氢氧化钠溶液调节pH值至2.5±0.1，加水至1000mL。

5.1312.5mol/L氢氧化钠溶液的配制：称取50g氢氧化钠，溶于水，加水稀释至100mL。

5.14乙腈饱和的正己烷的配制：取100mL的正己烷加入10mL的乙腈，充分振荡混合后，上层溶液为乙腈饱和的正己烷。

5.15磷酸二丁胺缓冲液：取二丁胺16.8mL，加磷酸溶液（1→10）70mL，边加边搅拌，放冷后，用磷酸调节pH至2.5±0.1，加水至100mL。

6仪器和设备

6.1高效液相色谱仪(配有紫外检测器或二级管阵列检测器、柱温箱)。

6.2分析天平：感量0.1mg、0.01mg。

6.3离心机：低温冷冻离心机(≥6770G）。

6.4超声波清洗机。6.5涡旋混合机。

6.6微孔滤膜：孔径0.45μm纤维素滤膜。6.7旋转蒸发器。

7试样的制备

取待测新鲜的禽蛋去壳，充分搅拌，匀质。于-18℃以下保存。

8分析步骤

8.1提取

称取5g±0.05g试样，置于50mL离心管中，用10mL乙腈匀浆5min，高速冷冻6770G离心10min，移取上清液于50mL离心管中。离心管中的残渣再用10mL乙腈重复提取，合并上清液。在合并的上清液中加入无水硫酸钠3.0g，乙腈饱和的正己烷20