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一起轮状病毒中毒案例分析--第1页
【案例】3
患儿，半岁，女。以突然发病出现发热、水样腹泻和呕吐等症状于2012年
11月5日急诊入院，询问病史患儿为早产1个月，人工喂养，体检轻微脱水症，
蛋把戏粪便，体温38℃。患儿起病急，出现发热、水样腹泻和呕吐等症状，发病
时间为深秋，体检轻微脱水征，蛋把戏粪便。
【讨论题】你作为检验人员，如何进行采样并进行实验室检验确诊？
答：根据患儿表现出的症状〔发热、水样腹泻、呕吐、蛋把戏粪便〕以及患
病时间〔深秋季节〕，高度疑心为患儿感染了轮状病毒〔rotavirus〕；但是从患儿
轻微脱水症来看，患儿可能同时感染了肠道腺病毒〔entericadenovirus〕；虽然根
据症状细菌感染的概率较小，但同时还应该考虑到一些常见细菌的感染，例如：
致病性大肠杆菌、沙门菌、志贺痢疾杆菌、空肠弯曲菌等
1、采样：
对患儿近期所食奶粉、奶瓶、患儿粪便、患儿血液、患儿近期接触物品、与
患儿接触人群的手进行采样〔对近期所食奶粉、奶瓶、患儿近期接触物品、与患
儿接触人群的手进行采样检测可以确定患儿感染途径，对患儿粪便和血液进行检
测可以确诊引起患儿症状的原因〕
1.1婴儿奶粉采样：利用无菌钥匙取30g奶粉于无菌采样袋中，密封；
1.2奶瓶：洁净棉拭子采样法；
1.3患儿粪便：用采样杯采集婴儿新鲜粪便，防止尿不湿吸附影响检测结果。
于0度冰箱冻存，及时检测；
1.4患儿血液：普通真空采集管采集患儿足跟血；
1.5患儿近期接触物品：洁净棉拭子采样；
1.6与患儿接触人群的手：洁净棉拭子采样。
注：采集样本时应注意交叉污染，并做好唯一标记，样本采集完后立即消毒
洗手
2、样品前处理：
奶粉:xxg奶粉加xxml无菌温水溶解均匀
将采集样品用生理盐水溶解或稀释，然后做致病性大肠杆菌、沙门菌、志贺
痢疾杆菌、空肠弯曲菌的培养
3.实验室检测
3.1致病性大肠埃希菌
样品前处理
以无菌操作量取检样25mL,加入装有225mL营养肉汤的无菌锥形瓶(瓶内可
预置适当数量的无菌玻璃珠),振荡混匀。
增菌
将制备的样品匀液于36℃±1℃培养6h。取10μL,接种于30mL肠道菌增菌
肉汤管内,于42℃±1℃培养18h。
别离
将增菌液划线接种MAC和EMB琼脂平板,于36℃±1℃培养18h~24h,观
察菌落特征。在MAC琼脂平板上,分解乳糖的典型菌落为砖红色至桃红色,不分
解乳糖的菌落为无色或淡粉色;在EMB琼脂平板上,分解乳糖的典型菌落为中心
紫黑色带或不带金属光泽,不分解乳糖的菌落为无色或淡粉色。
学习文档仅供参考
一起轮状病毒中毒案例分析--第1页
一起轮状病毒中毒案例分析--第2页
生化试验
1选取平板上可疑菌落10个~20个(10个以下全选),应挑取乳糖发酵,以及乳
糖不发酵和缓慢发酵的菌落,分别接种TSI斜面。同时将这些培养物分别接种蛋
白胨水、尿素琼脂(pH7.2)和KCN肉汤。于36℃±1℃培养18h~24h。
2TSI斜面产酸或不产酸,底层产酸,靛基质阳性,H2S阴性和尿素酶阴性的培
养物为大肠埃希氏菌。TSI斜面底层不产酸,或H2S、KCN、尿素有任一项为阳
性的培养物
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