《微生物的实验室培养》（第2课时）名师教案2 (1).docVIP

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授课教师：韩晓静

课题

纯化大肠杆菌

课型

新课

第几课时

1

课时教学目标（三维）

知识目标：

1.说明纯化大肠杆菌的基本原理。

2.应用无菌技术的操作。

能力目标：

能够使用平板划线法和稀释涂布平板法纯化大肠杆菌。

情感态度与价值观目标：

形成勇于实践、严谨求实的科学态度和科学精神。

教学重点与难点

无菌技术的操作

教学方法与手段

讨论法实验法演示法多媒体

使用教材构想

本节课是在学习了微生物实验室培养的无菌技术，如消毒和灭菌、培养基的基础上进行的。学生已经有了无菌操作的意识。这节课要学习的平板划线操作和稀释涂布平板操作，其操作的每一步都需要做到无菌，只有熟悉、规范地进行无菌操作，才可能培养出纯净的微生物，本节课充分发挥学生的主动性，亲自动手进行平板划线操作，从中体会培养物纯净对于微生物实验室培养的重要性。

课时教学设计流程

教师行为

学生行为

设计意图

【导入】今天这节课我们学习微生物实验室培养的第二课时——纯化大肠杆菌（引出标题板书）

情景创设：教师：大家看我手里拿了一个什么？【展示】大平板

教师：对，一个超大的培养基，大到可以把我的手放进去。大家猜猜，我用手按一下培养基，几天后培养基会发生什么变化呢？

教师：是不是大家想的这样呢？我们一起看一张图片。(PPT展示手印图片)

教师：在手接触过的地方长满了各种颜色不同、形态大小不同的什么呢？

教师：那平板上这些菌落是怎么来的呢？（此时板书：菌落及平板，先画平板再写“菌落”）

教师：没错，菌落是有一个细胞或同种细胞生长繁殖形成的肉眼可见的子细胞群体（板书：平板上画一个点，涂大一点）从图上还可以看出我们生活中的微生物经常混杂生活在一起，菌落不仅可以使其呈现，还能将不同的微生物区分开来。因此菌落具有分离纯化微生物的作用。（此时板书：“分离纯化”）

教师：同学们注意到没，在你们的桌上有几个试管，这些试管里面放的是大肠杆菌菌液。（板书：试管及菌液）怎么判断这管是否为纯的大肠杆菌？

教师：这个同学的意思是要让菌液变成菌落（板书：画空箭头），从液体培养基转移到固体培养基上的过程称为接种（板书：接种），微生物接种的方法有很多种，常见的有平板划线法和稀释涂布平板法。（板书“平板划线法”、“稀释涂布平板法”）

什么叫平板划线法呢？哪个同学来回答？

教师：我听到几个关键词，分别是接种环、固体培养基、连续划线、稀释分散。是这样吧？很好，请坐。这几个词就涵盖了平板划线的原理，我们来具体分析。

首先我们用接种环沾取菌液，接种在固体培养基上，然后画出三条水平线，（板书：贴第一次划线的磁贴）思考：为什么要画线，还不是点点？

教师：嗯，线首和线尾哪个部分菌数少？

教师：好，请坐，那么一次划线还不足以稀释成单菌落，需要再次划线，第二次划线我们怎么划合适？教师：（板书：贴第二次划线的磁贴）之后重复以上操作，连续进行3次划线，最后划线结束时，我们看第五区域的线能否和第一区域的线首尾相连？

教师：嗯，第一区域菌数最多，第五区域菌数最少，通过连续划线起到了稀释分散的作用，最终可以产生单菌落，达到了分离纯化的目的。好，请坐。

教师：了解了原理，那我们来看一段平板划线操作的教学视频，在看的时候大家注意观察操作的每一个细节，仔细听里面的每一句话，通过观看视频思考学案上的几个问题。（展示平板划线视频）学生活动：看完视频后分析讨论学案上的思考题计时2分钟。教师：时间到，我们来分析第一个问题，数一数，本次操作共灼烧接种环几次？每次目的是否相同，为什么？

教师：这位同学观察很细致，回答没毛病，请坐。

第二个问题：为什么每次灼烧完都要冷却了再划线？

教师：第三个问题：平板划线时，不能划破培养基的原因？

教师：即使在划破处有单个细胞，也无法形成规则的菌落，菌落会沿着划破处生长，形成一个条状的菌落。学生活动：按照教学视频的演示，进行学生实验，注意事项提前说：酒精灯无菌区、接种环烧红、倒置培养（5-8分钟）

教师：操作结束，我们放到37°下恒温培养12-24小时

结果分析：这是咱们以前同学做出的结果，怎么样？

教师：那这个结果呢？

教师：那么大家思考杂菌污染可能的原因有哪些？

教师：好，以上是平板划线法分离纯化大肠杆菌的方法，接下来我们学习稀释涂布平板法。

稀释涂布平板法分为稀释和涂布（板书：用不同颜色的粉笔标出下划线）

原理是这样的：取1ml菌液放入含有9ml无菌水的试管中，稀释10倍，然后10倍试管中取1ml转移至9ml无菌水中，相当于稀释了102倍，以此类推，稀释到106倍。然后取10的4、5、6菌液0.1ml进行涂布，在稀释度合适的平板上可以长出单菌落。

接下来，我们还是来看一段本操作的演示视频。

学生活动：通过