T_GXAS 795-2024 冬凤兰无菌播种育苗技术规程.docxVIP

ICS65.020.20CCSB31

团体

GXAS

标准T/GXAS795—2024

冬凤兰无菌播种育苗技术规程

TechnicalcodeofpracticeonasepticseedingofCymbidiumdayanum

2024-08-06发布2024-08-12实施

广西标准化协会发布

T/GXAS795—2024

I

前言

本文件参照GB/T1.1—2020《标准化工作导则第1部分：标准化文件的结构和起草规则》的规定

起草。

请注意本文件的某些内容可能涉及专利。本文件的发布机构不承担识别专利的责任。本文件由广西壮族自治区农业科学院提出并宣贯。

本文件由广西标准化协会归口。

本文件起草单位：广西壮族自治区农业科学院、广西雅长兰科植物国家级自然保护区管理中心、广西亚热带园林植物研究中心有限责任公司。

本文件主要起草人：曾艳华、卜朝阳、何荆洲、龙蔷宇、王丰顺、李秀玲、范继征、罗亚进、韦妙琴、邓振海、焦雨。

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冬凤兰无菌播种育苗技术规程

1范围

本文件界定了冬凤兰（Cymbidiumdayanum）无菌播种育苗涉及的术语和定义，确立了冬凤兰无菌播种苗生产的程序，规定了外植体选择与处理、诱导培养、继代增殖培养、根芽分化、生根壮苗培养、生根苗移栽和管理等阶段的操作指示。

本文件适用于冬凤兰无菌播种育苗。

2规范性引用文件

下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款。其中，注日期的引用文件，仅该日期对应的版本适用于本文件；不注日期的引用文件，其必威体育精装版版本（包括所有的修改单）适用于本文件。

GB/T8321（所有部分）农药合理使用准则NY/T2306花卉种苗组培快繁技术规程

3术语和定义

下列术语和定义适用于本文件。3.1

原球茎protocorm

种子萌发过程中的形态学结构，种子的幼胚吸水膨胀，中部的胚细胞分裂增殖，突破合点端种皮形成球形或椭球形的芽状结构。

4繁殖材料准备

4.1母株选择

选择品种纯正、农艺性状优良、生长健壮、无病虫害的植株作为母株。

4.2人工授粉

雌花开花后2d～3d，选择同株母本进行异花自交。授粉时用消毒镊子将母本的花粉块剔除，接着用牙签蘸取同株另一健康花的花粉块放于母本合蕊柱药腔内，然后将母本花上的唇瓣除去。授粉完毕后在子房挂上标识牌，写明母本编号、授粉日期。一株母本授粉3个～4个。授粉一个月后疏果，每莛留2果。

4.3果实采集

在人工授粉且子房膨大8个月后，采集成熟未开裂的蒴果。

5无菌播种

5.1蒴果表面灭菌

用75％的乙醇将果实擦拭干净，置于超净工作台内；将蒴果用浓度为75％的乙醇浸泡30s；再用0.1％的氯化汞表面灭菌15min；无菌水冲洗4次，用无菌滤纸吸干水分待用。

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5.2种子预处理

用灭菌刀片切掉蒴果两头，纵向剖开蒴果，将种子取出置于规格为4cm×6cm的无纺布茶包袋中，将茶袋抽绳拉紧，置于0.2mol/LNaClO中浸泡15min。

5.3培养条件

培养室温度（25±2）℃,湿度40％～60％，种子播种后遮光培养，待萌发后光照强度2000lx，光照时间为10h/d～12h/d。

5.4诱导培养

种子经无菌水冲洗两遍后，用接种勺将适量种子转移至诱导培养基上（参见附录A），滴加1～2滴无菌水摇匀，让种子均匀分布在培养基表面。

5.5继代增殖培养

种子萌出原球茎以后，将其分割成0.4cm3～0.6cm3小块，分别接种到增殖培养基（参见附录A），规格为230mL的培养瓶，每瓶接种5块～8块，培养30d。增殖代数宜在10代以内。

5.6根芽分化培养

将初代或继代培养诱导的原球茎，切割成0.4cm3～0.6cm3小块，转接至根芽分化培养基上（参见附录A），规格为230mL的培养瓶，每瓶接种5～8块，培养20d～30d。

5.7生根壮苗培养

将苗高3cm～5cm，生长健壮、长势一致的小苗转接至生根培养基中（参见附录A），规格为630mL~

650mL的培养瓶，每瓶接种15株，培养30d～40d。

6炼苗移栽

6.1炼苗

将培养瓶中的生根组培苗带瓶转移至遮光度为50％～70％，温度为（28±2）℃的温室中，不打开瓶盖炼苗10d～15d。

6.2移栽

选择干净、透气保水的基质，3mm～6mm树皮与珍珠岩按体积比2:1混配；移栽容器为塑料穴