《免疫实验》教学课件合集（非AI生成）.pptx

实验一静脉采血法;;;;;实验二血细胞比容的测定;;;;;实验三红细胞平均值计算;1．红细胞平均体积（MCV）;2.红细胞平均血红蛋白含量（MCH）;3．平均RBC血红蛋白浓度(MCHC);4．参考值、临床意义：

用于贫血的形态学分类及病因分析;类型MCV（fl）MCH（pg）MCHC（g/l）

参考值（82～92）（27～31）（320～360）

大cell性贫血9231正常

正常cell性贫血正常正常正常

单纯小cell性贫血8227正常;实验四网织红细胞计数;;;;3.制备涂片取混匀染色血1滴制成薄涂片，自然干燥。

4.观察低倍镜下观察红细胞的分布和染色情况，并选择红细胞分布均匀、着色好的部位。

5.计数在油镜下对所选择部位计数至少1000个红细胞中的网织红细胞。;;;;实验五红细胞沉降率测定;;;;双向琼脂扩散试验

;实验目的：;可溶性抗原（如细菌浸出液、含菌病料浸出液、血清以及其他来源的蛋白质、多糖质、类脂体等）与其相应的抗体相遇后，在电解质参与下，抗原抗体结合形成白色絮状沉淀，出现白色沉淀线，此种现象称为沉淀反应。

沉淀反应中的抗原叫沉淀原（precipitinogen）,与沉淀原发生反应的抗体称为沉淀素（precipitin）。

沉淀反应主要包括有环状沉淀反应、絮状沉淀反应和琼脂扩散反应。;将可溶性抗原和抗体置于琼脂凝胶板的对应孔中，两者各自在凝胶中向四周自由扩散，

当抗原与抗体相遇，在比例合适时形成可见的白色沉淀线。沉淀线的特征与抗原抗体的浓度、纯度和扩散速率等有关。

;一种抗原抗体系统只出现一条沉淀带

根据沉淀带出现的数目、位置以及相邻二条沉淀带之间的融合、交叉、分枝等情况，就可了解该复合抗原的组成。

?;免疫学及免疫学检验;免疫学及免疫学检验;抗体效价滴定

用梅花型孔，中间放抗原，

周围孔放下不同稀释度的

相应抗体，以出现沉淀线

的最高稀释倍数为该抗体

的效价。;材料与试剂

1．琼脂粉

2．微量加样器、打孔器、载玻片、湿盒、温箱

3.抗原健康人血清，用生理盐水做1:5-1:40系列倍比稀释

5.抗体羊抗人IgG抗血清;操作方法

1．称取一定量的琼脂粉，按1.5%（10-15g/L）的比例加入生理盐水，煮沸融化。

2．取一张洁净干燥的载玻片，置于水平台上，用吸管取充分混匀的抗体琼脂液4ml浇于载玻片上，置于室温冷却凝固。制板要求布满整张玻片，切均匀平整，厚薄一致无气泡。

3．根据要求（孔径即孔的直径，孔距即两孔圆心之间的距离，包括两孔的半径3－5mm）打成梅花形孔图。;;4．可用注射器针头挑出孔中琼脂。孔要求打得圆而光滑，边缘不能有破裂。

5．在火焰上缓缓加热，使孔底边缘的琼脂少许熔化，以封底，以免加样后液体从孔底渗漏。

6．吸取样品加入孔内(约10ul)，以加满为度。中心孔加入抗体，周围孔分别加入不同稀释度的抗原。

7．扩散将加样的琼脂凝胶板放在湿盒内，置于37度，24h后观察结果。若沉淀环不清晰可用1%的鞣酸浸泡10min。

;;42;结果判定

．用以检测抗原或比较抗原差异时，将抗血清置中心孔，将待测抗原或需比较的抗原置于周围相邻孔。若出现沉淀带完全融合，证明为同种抗原；若二者有部分相连，表明二者有共同抗原决定簇；若二条沉淀线相互交叉，说明二者抗原完全不同。;1.双扩散用于疾病诊断：以IBD（炎性肠病）诊断为例，中心孔加IBD标准阳性血清，周围孔分别加IBD标准抗原、生理盐水、待检抗原1.2.3.4。

2.双扩散用于抗体检测：以免疫鸡IBD抗体检测为例，中心孔加IBD标准抗原，周围孔分别加IBD标准阳性血清.、IBD阴性血清、待检血清

1.2.3.4。;;;;;49;;三、胶乳凝集试验

;【实验原理】

类风湿因子(rheumatoidfactor,RF)是一组抗变性IgG的自身抗体，它能与人或动物的变性IgG结合，而不与正常人IgG发生凝集反应。根据这一特点，将处理过的人IgG与羧化聚苯乙烯胶乳共价交联，使其吸附于胶乳颗粒载体上，成为致敏的胶乳颗粒。当待检血清中有RF时，则致敏的胶乳颗粒上的变性IgG与相对应的抗体(RF)发生反应，出现凝集现象。

;;【操作方法】

1.在黑色方格反应板上三个格分别做好标记，用微量加样器各加待检血清、阳性血清、阴性血清1滴(约50μl)，然后分别加