马铃薯早疫病检测技术规程.pdf

马铃薯早疫病检测技术规程

1范围

本标准规定了马铃薯早疫病田间检测和室内检测。

本标准适用于马铃薯植株和块茎早疫病检测。

2规范性引用文件

下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本适用于本文件。

凡是不注日期的引用文件，其必威体育精装版版本（包括所有的修改单）适用于本文件。

GB7331-2003马铃薯种薯产地检疫规程

GB8855新鲜水果和蔬菜的取样方法

GB6682分析实验室用水规格和试验方法

3田间检测

3.1抽样

抽样参照GB7331-2003中.2规定的方法执行。

3.2田间症状鉴别

田间病株和薯块症状，以肉眼观察为主（参见附录A）。

4室内检测

4.1取样方法

取样方法参照GB8855中规定执行。

4.2实验用水

实验用水应符合GB6682的规定。

4.3试剂

NaClO、盐酸、75%酒精、无菌水、马铃薯葡萄糖X脂（PDA培养基），所用试剂级别均为分析纯。

4.4仪器和器具

培养箱、生物显微镜、无菌操作台、载玻片和盖玻片、培养皿、酒精灯、手术刀、灭菌锅等。

4.5操作步骤

4.5.1直接镜检

若样品发病部位已有霉层存在，可挑取其霉层直接镜检。若无霉层，则按以下步骤进行：将待检叶

片用蒸馏水清洗晾干后，放入保湿器皿中，放在25℃培养箱内培养1d～4d后，挑取霉层直接镜检；

1

将待检块茎用自来水清洗后，用1%NaClO溶液表面消毒3min～5min，再用无菌水清洗3次，晾干，

将块茎切片或直接放入保湿器皿中，放在25℃培养箱中暗培养3d～5d。挑取霉层直接镜检。

4.5.2分离培养后镜检

用无菌刀片切取病健交界处的叶片或块茎病组织，面积约为5mm×5mm大小，放入75%的酒精中

进行组织表面消毒2min，用无菌水冲洗3次，再用无菌滤纸将叶片表面的水分吸干，放入无菌的PDA

培养基上。每个培养基上一般放置3～4片，在25℃下恒温培养。3d～4d后，在无菌条件下挑取病

组织周围长出的尖端菌丝，移入PDA培养基进行纯化培养。在25℃光（光照强度大于3000lux，16h）

和暗（8h）交替恒温培养4d左右，挑取少量菌丝，镜检。

4.6结果判定

将压好的玻片放在生物显微镜下观察病原菌形态特征，如果镜下的分生孢子形态符合茄链格孢菌的

形态特征，则判定为马铃薯早疫病菌（参见附录B）。

附录A

（资料性附录）

马铃薯早疫病主要典型症状

A.1马铃薯早疫病叶片症状

2

在植株下部叶片或老叶上产生小的、近圆形、褐色至深褐色病斑，病斑可迅速扩大，其上产生黑色

XX轮纹和少量黑色霉层。严重时，整个病斑相互连接，但受叶脉限制成三角形或不规则形，最后穿孔，

叶片变黄，干枯，甚至脱落。见图A.1。

图A.1马铃薯早疫病叶片症状

A.2马铃薯早疫病茎部症状

叶柄受害多发生于分枝处，病斑褐色，线条形，稍凹陷，扩大后呈灰褐色长椭圆形病斑，有轮纹。

见图A.2。

图A.2马铃薯早疫病茎部症状

A.3马铃薯早疫病块茎症状

块茎被侵染后，产生暗褐色，稍凹陷，圆形或近圆形病斑，大小不等，有的病斑，直径可达2cm。

边缘明显，皮下呈浅褐色、海绵状干腐，深度一般不超过6mm，在老化的病斑上，可以产生裂缝。在

贮藏期间病斑可增大，块茎皱缩。见图A.3。