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微生物的选择培养和计数

1.基于实例分析，说明选择培养基的概念和如何设计培养基来

3.1.3举例说明通过调整培养基的配方可分离分解尿素的细菌。科（学思维，科学探究）

有目的地培养某种微生物2.通过学习稀释涂布平板法，运用分析与综合的科学方法,总结

3.1.概述平板划线法和稀释涂布平板法分离微生物的过程。科（学思维）

是实验室中进行微生物分离和纯化的常用3.基于稀释涂布平板法和显微镜计数法，运用归纳与概括的科

方法学方法,概述测定微生物数量的常用方法。科（学思维）

3.1.5概述稀释涂布平板法和显微镜计数.基于微生物的选择培养和数量测定原理，通过稀释涂布平板

法是测定微生物数量的常用方法法接种并分离得到分解尿素的细菌菌落，对实验结果进行分

析与评价。科（学探究，科学思维）

必备知识•素养奠基

一、选择培养基

1.实验室中微生物筛选的原理:人为提供有利于目的菌生长的条件包（括营养、温度、pH等），同时抑制或阻

止其他微生物的生长。

2.选择培养基概念:在微生物学中，允许特定种类的微生物生长,同时抑制或阻止其他种类微生物生长的培

养基。

3.选择培养基配方的设计：

1（）原理:分解尿素的细菌合成的酥酶将尿素分解产生Nfto

2（）培养基配方设计：以尿素为唯一氮源的选择培养基。

激

如果要从土壤中分离出固氮微生物,那么对培养基有什么要求呢？

提示:固氮微生物能利用空气中的瓯因此培养基中不应添加氮源,这样就只有固氮微生物才能生存。

二、微生物的选择培养

1.方法:对样品进行充分稀释,然后将菌液涂布到制备好的选择培养基上。

2.稀释涂布平板法的操作过程：

⑴系列梯度稀释操作:

1mL1mL1mL1mL1mL1mL

10g土样+90mL无菌水9mL无菌水

2（）涂布平板操作。

①取菌液:取0.1mL菌液,添加到培养基表面。？

②涂布器灭菌:取出浸在酒精中的涂布器,放在火焰上燃烧,酒精燃尽后,冷却涂布器。

③涂布过程:用涂布器将菌液均匀地涂布在培养基表面,涂布时可转动培养皿,使菌液分布均匀。

3.培养:待涂布的菌液被培养基吸收后,将平板倒置,放入恒温培养箱中培养,观察。

下汲藏

在进行稀释操作时，需要在酒精灯火焰附近操作吗?解释原因。

提示:需要。在进行稀释操作时,如果不在酒精灯火焰附近进行,就有可能造成杂菌污染。

三、微生物的数量测定

1.稀释涂布平板法：

(1)统计依据。

当样品的稀释度足够高时,培养基表面生长的一个菌落,来源于样品稀释液中的一个菌。通过统计平板上

的菌落数,就能推测出样品中大约含有多少菌。

⑵操作。

①一般选择菌落数为30〜300的平板进行计数。

②选用一定稀释范围的样品液进行培养,在同一稀释度下,应至少对个平板进行重复计数,然后求平均值。

2.显微镜直接计数:利用特定的细菌计数板或血细胞让数板,在显微镜下观察、计数,然后再计算一定体积

的样品中微生物的数量。

四、探究•实践一一土壤中分解尿素的细菌的分离与计数

1.提出问题:如何分离土壤中分解尿素的细菌?每克土壤样品中含有多少分解尿素的细菌？

2.基础知识：

组分含量提供的主要营养

KH2PO41.4g

NaHP02.1g无机盐

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