脓毒症检测试剂盒(荧光PCR法) 项目立项报告.pdfVIP

项目立项报告

项目名称：脓毒症检测试剂盒

（荧光PCR法）

项目编号：2018-002

起草人/日期：

审核人/日期：

批准人/日期：

XXXX医疗科技有限公司

二〇××年××月××日制

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一、立项依据

脓毒症和脓毒性休克是急危重症医学面临的重要临床问题,全球每年脓毒症患病人数超

过1900万,其中有600万患者死亡,病死率超过1/4,存活的患者中约有300万人存在认知功

能障碍。早期识别与恰当处理可改善脓毒症患者的预后。

《中国脓毒症/脓毒性休克急诊治疗指南(2018)》强烈推荐抗菌药物在入院后或判断脓毒

症以后尽快使用,最佳在1h内,延迟不超过3h。抗菌药物的尽早使用对脓毒症或脓毒性休克

患者的预后至关重要。在出现脓毒症或脓毒性休克的情况下,延迟应用抗菌药物将增加病死率,

且抗菌药物的延迟应用对住院时间、感染相关的器官损伤等次要终点产生不良影响。Meta分

析研究均支持脓毒症和脓毒性休克患者尽早应用抗菌药物。

该指南还推荐，对于怀疑脓毒症或脓毒性休克患者,在不显著延迟启动抗菌药物治疗的前

提下,推荐常规进行微生物培养(至少包括两组血培养)(BPS)。

但是，微生物培养耗时长，通常需要两天以上的时间，而且灵敏度不高。本项目旨在研

究出一种新的检测方法，以取代微生物培养，对脓毒症相关的24种微生物进行菌种鉴定和耐

药基因鉴定，提高脓毒症患者的生存率，并有效改善其预后效果。

二、研究内容

体外定性检测人体血液中的肠球菌属、李斯特菌、葡萄球菌、金黄色葡萄球菌、无乳链

球菌、肺炎链球菌、化脓性链球菌、鲍氏不动杆菌、肠杆菌属、阴沟肠杆菌、大肠杆菌、产

酸克雷伯菌、肺炎克雷伯菌、变形杆菌属、粘质沙雷氏菌、流感嗜血杆菌、脑膜炎奈瑟菌、

铜绿假单胞菌、白色念珠菌、光滑假丝酵母、克鲁斯假丝酵母、近平滑假丝酵母、热带假丝

酵母）及其包含的耐药基因（mecA、vanA/B、blaKPC）。

三、研究方法及技术路线

采用荧光PCR法进行研究。

四、项目可行性分析

（一）现有技术基础

全新项目，无基础。

（二）研发可行性分析

1.人：

需要生物学、微生物学相关专业的研发人员，本科及以上，需要有荧光PCR相关的工作

经验或在校期间参与了荧光PCR相关的研究课题，能进行引物探针设计、能独立进行荧光

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PCR实验。具备一定的统计学基础。至少2人。

2.机：

需要实时荧光PCR仪一台、微量紫外分光光度计一台、荧光计一台、移液器若干、超净

工作台一台、生物安全柜一台、瞬间离心机一台、涡旋仪一台、医用冷藏箱一台、医用冷冻

箱一台、超低温冰箱一台。

3.料：

主要原料包括引物、探针、DNA聚合酶、参考品、质控品。

引物探针：主要是自己设计，然后由专门的引物合成公司合成，著名的合成企业包括生

工、英潍捷基；

DNA聚合酶：市面上有许多品牌，易于获取，国产与进口的价格差异大，需要在研发工

作中实际考察才能确定如何选择。

参考品：本产品有国家参考品。公司需要自制参考品，主要思路是从菌种保存机构购买

可溯源的标准菌株，经过定量后作为企业参考品使用。

质控品：质控品考虑用PCR扩增产物经过基因工程技术加工，插入到质粒中。

4.法：

该产品属于3类体外诊断试剂，不能豁免临床。

相关的行业标准包括《细菌和真菌感染多重核酸检测试剂盒》征求意见稿。

尚无注册指导原则。

需要遵守生物安全相关的法规规定。

5.环：

整个研究过程宜在PCR实验室中进行，实验室的设计和管理可参考卫办医政发〔2010〕

194号《医疗机构临床基因扩增检验实验室管理办法》，整个过程严格防止PCR扩增产物对

后续实验的影响。

研发过程中会用到种种需要在2-8℃、-20℃±5℃、≤-70℃的条件下