1.2.2微生物的选择培养与计数课件-高二下学期生物人教版选择性必修3.pptx

1.2微生物的培养技术及应用高压蒸汽灭菌液体培养基二微生物的选择培养与计数

课题背景自然界中微生物数量繁多，种类庞杂，要想从中分离出需要的特定微生物并不容易，尤其当要分离的微生物在混合菌群中不是优势种群时，更难实现。稀释涂布平板法呈现的杂菌群那么我们又如何达成这一目标呢？科学家们应用选择性培养基解决了这一难题。

1.科学实例：寻找耐高温的DNA聚合酶启示：寻找目的菌种时要根据它对生存环境的要求，到相应的环境中去寻找。筛选原因：因为热泉的高温条件淘汰了绝大多数微生物，使耐热的Taq细菌保留下来。PCR是一种在体外DNA复制的技术，此项技术要求使用耐高温（930C）的DNA聚合酶。1973年，布鲁克在美国黄石国家公园的一个热泉中发现了耐热的Taq细菌，并分离到耐高温的DNA聚合酶（Taq酶）。（一）选择培养基那么，如何从众多的微生物中筛选出单一菌种？耐热微生物耐寒微生物

1.实验室中微生物筛选的原理人为提供_________________的条件（包括_____、_____和_____等），同时___________________________。有利于目的菌生长抑制或阻止其他微生物的生长营养温度pH2.选择培养基的概念在微生物学中，将允许生长，同时或其他种类微生物生长的培养基称为选择培养基。特定种类的微生物抑制阻止3.选择培养基的类型选择培养基的类型条件分离得到的菌种改变培养条件70～80℃的高温添加某种化学物质加入青霉素高浓度食盐特殊碳、氮源石油是唯一碳源营养缺陷型培养基不加碳源不加氮源水生栖热菌酵母菌、霉菌等真菌金黄色葡萄球菌能消除石油污染的微生物自养型微生物固氮菌如何筛选出耐酸菌？

1.为培养和分离出酵母菌并淘汰杂菌，常在培养基中加入（）A.较多的氮源物质B.较多的碳源物质 C.青霉素类药物D.高浓度食盐C2.能合成脲酶的微生物所需要的碳源和氮源分别是（）A.CO2和N2B.葡萄糖和N2C.CO2和尿素D.葡萄糖和尿素D

培养基中加氨苄青霉素没有氨苄青霉素抗性的细菌没有氨苄青霉素抗性的细菌被淘汰有氨苄青霉素抗性的细菌怎样选择出抗氨苄青霉素能力的细菌?举例怎样才能从筛选土壤中分解尿素的细菌？

思考-讨论分解尿素的细菌有何特点尿素的立体结构尿素［CO(NH2)2］含氮量高，化学性质稳定，是现代农业生产中一种重要的氮肥。尿素被土壤中某些细菌分解成NH3,再被转化为NO3-、NH4+等被植物吸收。这些细菌之所以能分解尿素，是因为能合成脲酶，来催化尿素分解。讨论：你如何设计培养基配方，将土壤稀释液中能分解尿素的细菌分离出来？使用以尿素作为唯一氮源的选择培养基，只有能合成脲酶的微生物才能分解尿素。缺乏脲酶的微生物由于不能分解尿素、缺乏氮源而不能生长发育繁殖

牛肉膏5.0g蛋白胨10.0gNaCl5.0g琼脂20.0g蒸馏水定容到1000mlKH2PO41.4gNaH2PO42.1gMgSO4·7H2O0.2g葡萄糖10.0g尿素CO(NH2)21.0g琼脂15.0g蒸馏水定容到1000ml培养基一培养基二讨论：1.从物理性质看两种培养基属于哪类？依据是什么？培养基的主要用途是什么？都属于固体培养基。依据是添加了凝固剂琼脂，且比例为1.5%-2%。培养基的主要用途是分离、鉴定、计数。2.从用途上来讲，哪个属于选择培养基？将得到何种细菌？培养基二属于选择培养基；其可获得能分解尿素的微生物。3.两种培养基中共有哪些成分？碳源、氮源、无机盐、水（一）设计选择培养基的配方①提供无机盐；②调节pH。

用设计好的选择培养基，分离土壤中能分解尿素的细菌，并研究土壤样品中含有多少这样的细菌？分离出土壤中分解尿素的细菌一、选择培养基的制备二、对土壤样品进行稀释三、涂布平板操作四、培养并观察培养基菌落五、计数土壤样品中菌落数目阅读课本19页探究实践，总结实验流程：获得分解尿素的细菌的纯培养物测定分解尿素的细菌的数量稀释涂布平板法梯度稀释涂布平板

葡萄糖10.0g尿素1.0gKH2PO41.4gNa2HPO42.1gMgSO4·7H2O0.2g琼脂15.0g蒸馏水1000ml①原理：绝大多数微生物都能利用葡萄糖，但是只有能合成脲酶的微生物才能分解尿素。利用以尿素作唯一氮源的选择培养基，可以从土壤中分离出分解尿素的细菌。1.选择培养基的制备②配方：制备选择培养基（尿素为唯一氮源）

细菌宜在酸碱度接近中性的潮湿土壤中生长，绝大部分分