DB3418T 007-2019 毛笔笔锋霉变的测试方法.docxVIP

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DB3418

宣城市地方标准

DB3418/T007—2019

毛笔笔锋霉变的测试方法

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2019-03-20发布2019-04-20实施

宣城市市场监督管理局发布

DB3418/T007—2019

I

前言

本标准按照GB/T1.1-2009给出的规则起草。

本标准由安徽省文房四宝标准化技术委员会提出并归口。本标准主要起草单位：宣城市产品质量监督检验所。

本标准主要起草人：洪润、吴成、柳叶、周万鹏、童伟。

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毛笔笔锋霉变的测试方法

1范围

本标准规定了毛笔笔锋霉变的检测方法。

本标准适用于毛笔及工艺类似的毛笔笔锋霉变的检测，不适用其他笔类。

2规范性引用文件

下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅所注日期的版本适用于本文件。凡是不注日期的引用文件，其必威体育精装版版本（包括所有的修改单）适用于本文件。

GB/T1.1标准化工作导则第1部分：标准的结构和编写

GB4789.2食品安全国家标准食品微生物学检验菌落总数测定

3设备和材料

3.1培养箱：28℃±1℃。

3.2电子天平：精确度0.1g。

3.3无菌锥形瓶：容量500mL。

3.4无菌吸管：1mL、10mL。

3.5无菌试管：18mm×180mm。

3.6旋涡混合器。

3.7无菌平皿：直径90mm。

3.8恒温水浴箱：46℃±1℃。

3.9显微镜：10倍~100倍。

3.10移液枪及移液吸管：100μL~1000μL、1000μL~10000μL。

4培养基和试剂

4.1蒸馏水。

4.2生理盐水：见附录A.1。

4.3马铃薯葡萄糖琼脂：见附录A.2。

4.4孟加拉红琼脂：见附录A.3。

4.5磷酸盐缓冲液：见附录A.4。

5检验程序

霉菌计数法检验程序见图1。

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检样

检样

1g样品+9mL无菌稀释液，均质

10倍系列稀释

选择2个~3个适宜稀释度的样品均液，每个平皿加入1mL,每个稀释度做两个平行

每皿中加入20mL~25mL马铃薯葡萄糖琼脂或孟加拉红琼脂

28℃±1℃120h

菌落计数

报告

图1霉菌平板计数法的检验程序

6操作步骤

6.1样品的稀释

6.1.1用无菌剪刀剪取至少3支待测毛笔笔锋，要求剪取全部毛笔笔锋进行混匀，称取样品1g,精确至0.1g,加入9mL无菌稀释液(生理盐水或磷酸盐缓冲液),在旋涡混合器中充分混合1min~2min,制成1:

10的样品匀液。

6.1.2用移液枪吸取1mL1:10样品匀液注入含有9mL无菌稀释液的试管中，在旋涡混合器上混匀，此液为1:100的样品匀液。

6.1.3按6.1.2操作步骤，制备10倍递增系列稀释样品匀液。每递增稀释一次，换用1支1mL无菌吸管。

6.1.4选择2个~3个适宜稀释度的样品匀液，在进行10倍递增稀释的同时，每个稀释度分别吸取1mL样品匀液于2个无菌平皿内。同时分别取1mL无菌稀释液加入2个无菌平皿作空白对照。

6.1.5及时将冷却至46℃的马铃薯葡萄糖琼脂或孟加拉红琼脂(可放置于46℃土1℃恒温水浴箱中保温)倾注平皿中，倾注体积为20mL~25mL,同时均匀转动平皿使其混合均匀。将其放置于水平台面待培养基完全凝固。

6.2培养

培养基凝固后，正置平板，放置于28℃士1℃培养箱中培养，观察并记录培养至第120h的结果。

6.3霉菌菌落计数

用肉眼或放大镜观察，记录稀释倍数和相应的霉菌菌落数。以菌落形成单位(colony-formingunits,CFU)表示。

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选取菌落数在10CFU~150CFU的平板，根据菌落形态计数霉菌。霉菌蔓延生长覆盖整个平板记录为菌落蔓延。

7结果与报告

7.1结果

7.1.1计算同一稀释度的两个平板菌落数的平均值，再将平均值乘以相应稀释倍数。

7.1.2若有两个稀释度平板上菌落数均在10CFU~150CFU之间，则按照GB4789.2的相应规定进行计算。

7.1.3若所有平板上菌落数均大于150CFU，则对稀释度最高的平板进行计数，