医学教材 单克隆抗体药物的临床前研发.ppt

单克隆抗体药物的临床前研发背景知识?大分子药物——生物制药始于1982年用重组DNA技术进行生物合成的人胰岛素(rHI)举例激素(胰岛素，胰高血糖素，生长激素)造血生长因子(Erythropoietin,colonystimulatingfactors)干扰素(Interferons-α,-β,-γ)白介素(Interleukin-2)疫苗(HepatitisBsurfaceantigen)肿瘤坏死因子治疗用酶单克隆抗体来源于细菌、酵母、昆虫、植物和哺乳动物细胞等各种表达体系研发流程靶点的发现与选择单克隆抗体的制备药效筛选药动评价临床试验靶点的发现和选择集中在细胞死亡通路、血管生成、细胞周期调控信号转导等方面例如：CD20:表达于B细胞和成熟B细胞，调节B细胞增殖、分化；在95%以上的B细胞性淋巴瘤中表达抗CD20单抗可用于治疗B细胞非霍奇金淋巴瘤单抗药物工作机理：抗体依赖性细胞介导的毒作用(antibodydependentcell-mediatedcytotoxicity,ADCC)补体依赖性细胞毒作用(complementdependentcytotoxicity,CDC)中和细胞因子单抗药物作用机理经典靶点靶点表达细胞抗体药商品名厂家CD20Daudi,raji,RPMI-8226利妥昔单抗（Rituximab）美罗华（Rituxan）罗氏Her2MDA-MB-231,MCF-7,SK-OV-3曲妥珠单抗（Trasduzumab）赫赛汀（Herceptin）罗氏EGFRA431,A549西妥昔单抗（Cetuximab）爱必妥（Erbitux）默克－雪兰诺TNFαCHO-DG44-tnfα阿达木单抗（Adalimumab）修美乐（Humira）雅培VEGFHUVEC贝伐珠单抗（Bevacizumab）阿瓦斯汀（Avastin）罗氏?单克隆抗体的制备?抗体的人源化嵌合抗体：应用DNA重组技术将小鼠抗体基因上的可变区与人抗体基因的恒定区重组,再将重组后的基因导入骨髓瘤细胞中表达CDR移植抗体（改型抗体）：进一步用人的编码构架区(FR)替代鼠FR,形成更为完全的人源化抗体,即除了3个CDR是鼠源的外,其余全部是人源结构完全人源化抗体：1、噬菌体抗体库技术；2、转基因小鼠技术药效筛选功能鉴定：ADCC,CDC,中和细胞因子by抗体生产部门by药效部门ADCC—LDHreleaseADCCAssayonSK-BR-3CellswithNK92-CD16AAbConcentration,[?g/ml]%TargetCellLysis10-410-2100102-10010203040506070Herceptin(control)####Herceptin(control)log(agonist)vs.response--Variableslope(fourparameters)Best-fitvaluesBottom0.6537Top31.88LogEC50-2.545HillSlope1.118EC50,μg/ml0.002854药效筛选CDC--CTG###mediatedCDCLysisonU937_NHSConc.optimizationNHSConc.%TargetCellLysis20%10%5%0102030405060708090100RituxanmediatedCDConDaudiμg/ml%TargetCellLysis10-1100101102-20020406080100120Rituxanlog(agonist