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布鲁氏菌病检测技术
布鲁氏菌病检测技术
1.概况
布鲁氏菌病(简称布病),是由布鲁氏菌引起的一种人畜共患的传染
病。临床主要特征是母畜流产、乳腺炎、不育和各种组织(如睾丸、关节)
的炎症。人类感染布病后,病程长,反复发作,长期不愈。布病几乎遍及世
界各地。凡有牲畜的地区都有布病流行。据不完全统计,在160个国家和地
区中就有123个国家和地区有布病发生。我国多见于内蒙古、东北,西北等
牧区。在北方农区也有散发,常呈地地方性流行。
在不良环境,如抗生素的影响下,本菌易发生变异,通常变异形成的布
鲁氏菌可在机体内长期存在。该菌对热抵抗力不强,63℃经7~10min可被
杀死,在鲜乳中可存活2天到18个月,在冻肉中可存活14~47天,在干燥
土壤和胎儿体内可分别存活37天和6个月。对常用消毒药敏感,如0.1%
升汞数分钟,1%来苏儿或2%福尔马林15min可将其杀死。日光下曝晒4h
可杀死本菌。
人和多种动物对布鲁氏菌易感。动物中羊、牛、猪的易感性最强。母畜
比公畜,成年畜比幼年畜发病多。在母畜中,第一次妊娠母畜发病较多。带
菌动物,尤其是病畜、流产胎儿、胎衣是主要传染源。消化道、呼吸道、生
殖道是主要的感染途径,也可通过损伤的皮肤、粘膜等感染。常呈地方性流
行。人主要通过皮肤、粘膜和呼吸道感染。
本病一年四季均可发病。流行区在发病高峰季节(春末夏初)可呈点
状暴发流行。患病与职业有密切关系,如:兽医、畜牧工作者、屠宰工人、
皮毛工等感染机会较高。
人类布鲁氏菌病的预防,首先要注意职业性感染,凡在动物养殖区、
屠宰区、畜产品加工厂的工作者以及兽医、实验室工作人员等,必须严守防
护制度(即穿着防护服装,做好消毒工作),尤其在仔畜大批生产季节。更要
特别注意。病畜乳肉食品必须灭菌后食用。必要时可用疫苗接种,接种前应
行变态反应试验。阴性反应者才能接种。
2.实验室监测技术概述(据布鲁氏菌病防治技术规范)
2.1检测方法血清学实验或细菌分离。初筛试验选用虎红平板凝集试验
(RBPT)或乳牛布病全乳环状试验(MRT)(见GB/T18646)。正式试验选用动物
布病试管凝集试验(SAT)或动物布病补体结合试验(CFT)(见GB/T18646)
2.2监测对象:牛、羊、猪、鹿等动物。
2.3监测方法:采用流行病学调查、血清学方法,结合细菌分离进行监测。
2.4监测范围、数量
免疫地区:对新生畜、未免疫畜、免疫一年半或口服免疫一年以
后的牲畜进行监测(猪可在口服免疫半年后进行)。监测至少每年进行一次,
牧区县抽检500头(只)以上,农区和半农半牧区抽检200头(只)以上,交通
不便的边远地区抽检3个乡9个村50%的牲畜进行血清学监测。
非免疫地区:监测至少每年进行一次。达到控制标准的牧区县抽
检1000头(只)以上,农区和半农半牧区抽检500头(只)以上;达到稳定控
制标准的牧区县抽检500头(只)以上,农区和半农半牧区抽检200头(只)
以上。
所有的奶牛、奶山羊和种畜每年必须进行两次血清学监测。
2.5监测时间
对成年动物监测时,猪、羊在5月龄以上,牛在8月龄以上,怀孕
动物则在第1胎产后半个月至1个月间进行;对S2、M5、S19菌苗免疫接种
过的动物,在接种后18个月(猪接种后6个月)进行。
2.6监测结果的判定与报告
初筛试验出现阳性反应,并有流行病学史和临床症状或分离出布鲁
氏菌,判为病畜。
血清学正式试验中试管凝集试验阳性或补体结合试验阳性,判为阳
性畜。
判定时应注意排除其它疑似疾病和菌苗接种引起的血清学反应。
按要求使用和填写监测结果报告,并及时上报。
疫情处理必须严格执行《牛结核病防治技术规范》的有关要求。
3.实验室检测方法
实验室检测包括以下几种方法:
3.1细菌学检测
将样品剪成小块,用镊子夹住直接涂抹在肝汤琼脂平板上,一式两
份,一份放10%二氧化碳中培养,一份在普通环境中培养,一般37℃培养
10天,布氏杆菌菌落在上述琼脂板上呈无色、透明、圆形、隆起、表面光
滑、均质样的菌落、菌落中央有时有很小的颗粒,菌落开始微透明,
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