第13章 RNA生物合成 PPT课件.ppt

二、真核生物的转录转录起始点上游-25bp区段多数有共同的TATA序列，称为Hogness盒或TATA盒。不同物种、不同细胞、不同的基因，可以有不同的上游DNA序列，但都可统称为顺式作用元件(cis-actingelement)。（一）转录起始1.转录起始点的上游序列(upstreamsquences)与基因表达调控有关的DNA非编码序列，统称为顺式作用元件。真正转录终止点GCGC-CAAT-TATA..ATGAATAAA修饰点外显子内含子翻译起始转录起始TATA盒(Hognessbox)CAAT盒GC盒增强子切离加尾真核生物RNApolⅡ转录的基因翻译终止能直接或间接辨认、结合顺式作用元件，从而调节基因表达的一类蛋白质因子。反式作用因子中，直接或间接结合RNA聚合酶的蛋白质因子。2.反式作用因子(trans-actingfactor)转录因子(transcriptionalfactor,TF)参与RNA-polⅡ转录的TFⅡ转录因子功能TFⅡA稳定TFⅡD-DNA复合物TFⅡB促进polⅡ结合TFⅡDTBP结合TATA盒TAF辅助TBP-DNA结合TFⅡEATPaseTFⅡF解螺旋酶TFⅡH蛋白激酶活性,使CTD磷酸化TAF：TBPassociatedfactorsTBP辅因子TBP：TATAbindingproteinTATA结合蛋白3.转录起始前复合物(pre-initiationcomplex,PIC)真核生物RNA-pol不与DNA分子直接结合，而需依靠众多的转录因子。ⅡAⅡB由RNA-PolⅡ催化转录的PICPOL-ⅡTFⅡFⅡHⅡETBPTAFTFⅡD-ⅡA-ⅡB-DNA复合物TATAPOL-ⅡTFⅡFⅡHⅡECTD-PPIC组装完成，TFⅡH使CTD磷酸化ⅡAⅡBTBPTAFTATA拼板理论(piecingtheory)一个真核生物基因的转录需要3至5个转录因子。转录因子之间不同方案组合，生成有活性、专一性的复合物，再与RNA聚合酶搭配而有针对性地结合、转录相应的基因。按不同组合，人类约３.５万个基因，估计需转录因子３００余个即可。（二）转录延长*polⅡ大亚基CTD被TFⅡH磷酸化才能离开起动子区域并进入延长阶段。*真核生物转录延长过程与原核生物大致相似，但没有转录与翻译同步的现象。*RNA-pol前移处处都遇上核小体。*转录延长过程中随RNApol前移，可以观察到核小体移位或解聚现象。转录延长中的核小体移位和解聚RNA-Pol核小体转录方向移位RNA-PolRNA-Pol解聚及弯曲（三）真核生物的转录终止AAUAAAGUGUGUGAATAAAGTGTGT3′processing（核酸内切酶）—AAUAAA—Poly(A)NucleaseHelicasehnRNA5’Release转录终止修饰点pausepolII（一）真核生物mRNA的剪接1.hnRNA(heterogeneousnuclearRNA)富含Ｕ不均一核RNA，核内未被剪接的有内含子的mRNA前体。2.snRNA(smallnuclearRNA)种类：U1，U2，U3，U4，U5，U6等。几个重要概念第三节RNA的转录后加工一、真核生物新生mRNA的剪接和修饰核内小RNAsnRNP（小分子核糖核蛋白体）(RNA剪接的场所)核内蛋白质snRNA4.断裂基因(splitgene)真核生物的结构基因中，外显子被内含子间隔开，但连续镶嵌，为一个连续完整的蛋白质编码。这种基因称为断裂基因。3.外显子(exon)和内含子(intron)真核生物结构基因中的编码序列，称为外显子，非编码序列称为内含子。SPreBCA成熟的mRNA5′——3′SPreBCCAhnRNA胰岛素基因断裂基因的概念内含子的分类根据基因的类型和剪接的方式，通常把内含子分为4类。I：主要存在于线粒体、叶绿体及某些低等真核生物的rRNA基因；II：也发现于线粒体、叶绿体，转录产物是mRNA；III：是常见的形成套索结构后剪接，大多数mRNA基因有此类内含子；IV：是tRNA基因及其初级转录产物中的内含子，剪接