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黄柏药材的薄层鉴别

实验目的了解薄层色谱在药物分析中的应用；了解荧光薄层色谱的原理及应

用。

实验原理黄柏主要有效成分为异喹啉生物碱，此外还有酰胺类化合物、柠檬

苦素类化合物等，其主要成分在荧光薄层板上形成暗斑，用对照品进行对照，可起到

鉴别黄柏的作用。

材料、仪器与试剂

材料

黄柏药材对照品：(1)盐酸小檗碱对照品

(2)巴马汀对照品

仪器

电子天平，HH-S恒温水浴锅,SHZ-D循环水多用真空泵，DGX-9003鼓风干燥箱，

KQ3200DE型医用数控超声仪，电热恒温孤峰干燥箱8FG-01B，旋转蒸发器RE-52-05，

111粉碎机，WPH-203B三用紫外分析仪,硅胶G薄层自制板（10×10cm），双槽层析

缸。

试剂

甲醇、丙酮、苯，正丁醇、乙醇、冰乙酸，盐酸、浓硫酸，以上试药均为分析纯；香

兰素；G薄层层析硅胶为化学纯；羧甲基纤维素钠

实验方法与结果

(1)薄层板制备：以0.5%羧甲基纤维素钠为粘合剂的硅胶G板（按1：3比例）制

成，105℃活化30min，置干燥器备用，规格10x10cm。

(2)显色剂的制备：(1)10%硫酸乙醇溶液：5mL浓硫酸加乙醇到50mL。(2)8%香草醛

无水乙醇溶液与硫酸溶液(7-10)：0.4g香兰素加无水乙醇到5mL，35mL浓硫酸加水到

50mL，再将两者混合。

(3)供试品及对照品溶液制备

取本品药材粉末0.1g，细，加甲醇5mL，超声处理10min，滤过，滤液加甲醇至

5mL，即得供试品溶液；另取盐酸小檗碱标准品，加适量甲醇制成1mL含0.5mg的

对照品溶液；另取巴马汀标准品，加适量甲醇制成1mL含0.5mg的对照品溶液。

(4)点样、展开、显色

照薄层色谱法（中国药典2000版一部附录VIB）试验，各吸取对照品和供试品

溶液1~2µL，分别点于同一硅胶G薄层板上，以正丁醇-冰醋酸-水（7：1：2）作为

展开剂，展开8cm，取出，晾干，置于紫外光灯365nm下检测，显相同荧光斑点。

(5)实验结果

供试品色谱中，在与巴马汀对照品和盐酸小檗碱对照品色谱相应的位置上，显示

一个相同的主斑点，结果见图

365nm紫外光灯下

白光下

左起第1点为巴马汀对照品，第2点为盐酸小檗碱对照品，第3-7点为5批不同来源

的川黄柏，第8-12点依次为5批不同来源关黄柏。结果显示盐酸小檗碱在川黄柏中

的含量较高，在关黄柏中含量较低；巴马汀在川黄柏中含量极少，而在关黄柏中有较

高含量。

讨论

薄层色谱法（thinlayerchromatography，TLC）是中药质量控制中应用最为广泛

的一种鉴别方法，它是利用中草药成分在薄层上层析后产生分离及分离后各组分相对

位移值的不同而进行分离分析。薄层色谱法具有直观、特征性强、取样量小、经济、

快速、简便的特点，得到了迅速发展，已成为目前药物分析中应用广泛的色谱方法之

一，尤其在中药材的鉴别研究中更为常用。本实验采用薄层色谱法对黄柏中的有效成

分巴马汀及盐酸小檗碱进行了定性鉴别，取得了较好的效果。