无菌检查法验证要点.pdfVIP

浙江红雨医药用品有限公司

无菌检验方法

验证方案及报告

验证方案申请人:日期:年月日

验证方案审核人:日期:年月日

验证方案审批人:日期:年月日

1概述

无菌检查法是为了检查药典要求无菌的医疗器械产品是否无菌而建立的检查法，是作

为批准无菌产品放行的检验或监督部门对无菌产品质量监督中的一个重要项目。它是根据用

于实验的培养基中是否有微生物生长来判定样品的无菌性，液体培养基变浑浊一般表明样

品受微生物的污染。基于微生物污染的不均匀性，使无菌检查法结果的可信度受许多因素制

约，如抑菌因素、检查法、检验量、检查用的培养基质量、操作环境、无菌技术等。检验

方法的验证是现代质量保证体系中关系到质控技术、方法、手段的科学性、准确性的重要组

成部分，是保证检验结果的公正、科学、准确的基础。

2验证目的

对本公司所采用的直接接种无菌检查法进行分析验证，以证明所采用的方法适合于本

公司产品的无菌检查。

3实验原理

直接接种法是通过加入一定的抑菌中和剂，以方便而快捷地中和抑菌剂，消除抑菌作

用，从而消除抑菌作用对无菌检查的影响。

本实验通过设计对照试验对直接接种法所加入的抑菌剂的中和效果进行验证，从而得

出直接接种法无菌检验的有效性。

4验证范围

实用于本公司所采用的直接接种法进行的无菌检验过程验证。

5执行程序

文件编码文件名称存放部门

HY-QC-012无菌检验操作规程品管部

6职责

姓名职务职责

刘传杰经理负责验证方案的批准实施、验证报告的批准

周德标QC验证方案、验证报告的起草并负责验证过程中现场的监控及取样

张思东QC负责按制订无菌检验规程实施检验和验证实验

7验证内容

建立样品组、对照组及菌种活性检查组，接种菌株到指定培养基，培养24~72小时，比

较观察菌落的生长状况，得出结论。

8验证指示物

本实验所用菌种为购于浙江省食品药品检验研究所标准菌株:金黄色葡萄球菌、白色

念球菌、大肠埃希菌及生孢梭菌。

9实验过程

（1）培养基的配制

用于大肠埃希菌、金黄色葡萄球菌的营养琼脂培养基

用于白色念球菌的改良马丁培养基

用于生孢梭菌的流体硫乙醇酸盐培养基

（2）供试品的制备

创可贴供试品：将包装好的创可贴打开，用剪刀将创可贴剪碎，放入100mlpH7.0

氯化钠—蛋白胨缓冲液中浸泡1小时，取水层作为供试品。

无菌敷贴供试品：将包装好的无菌敷贴打开，用剪刀将无菌敷贴剪碎，放入100mlpH7.0

氯化钠—蛋白胨缓冲液中浸泡1小时，取水层作为供试品。

（3）供试菌液的制备

大肠埃希菌菌液：取经35℃培养19小时的大肠埃希菌培养物1ml，加9ml生理盐水，

-5-8

10倍稀释至约10~10之间,混匀备用。

金黄色葡萄球菌菌液：取经35℃培养19h小时的金黄色葡萄球菌培养物1ml，加9ml

-5-8。

生理盐水，10倍稀释至约0~10之间,混匀备用

白色念球菌菌液：取经25.5℃培养72小时的白色念珠菌真菌斜面培养物，加入生理盐