艾滋病检测技术HIV-1核酸检测规范.pdfVIP

艾滋病检测技术HIV-1核酸检测规范

1范围

本章规定了HIV-1核酸定性和定量检测（病毒载量）的意义、实验室要求、

检测方法、质量控制及结果判定标准，适用于HIV-1核酸的定性检测和定量的

测定。

2核酸检测的意义

核酸检测可用于HIV感染诊断、血液筛查、病程评估及抗病毒治疗效果监

测。

2.1感染诊断

2.1.1作为补充试验：用于筛查试验有反应但抗体确证试验不确定或阴性样本

的判定；对筛查试验有反应但抗体确证试验不确定或阴性的疑似艾滋病晚期患

者需将核酸检测、临床病史和CD4+T淋巴细胞计数检测结果综合判断。对于抗

体筛查试验阴性但免疫功能低下者，也可进行核酸检测，结合临床综合判断。

2.1.2急性期诊断：对近期有明确流行病学史的个体，包括患有性病或有性病

史，有同性和异性性接触不安全性行为，有共用注射器吸毒史，有医源性暴露

史，有职业暴露史，HIV/AIDS患者的配偶或性伴侣，HIV/AIDS母亲所生子女

等，如抗体筛查试验无反应，可通过核酸检测判定是否为急性期感染。核酸检

测结果阴性或低于最低检测限不能排除HIV-1感染。

2.1.3HIV-1暴露婴儿感染早期诊断

HIV-1感染母亲所生小于18个月龄的婴儿，不同时间的两次HIV-1核酸检

测均为阳性即可作出诊断。18个月龄以上儿童诊断与成人相同。

2.2血液筛查：对献血者及采供血机构的原料血浆进行核酸检测，可及时发现

窗口期感染，降低输血的“残余危险度”，减少二代传播。

2.3抗病毒治疗效果监测

HIV感染者和艾滋病病人经抗病毒药物治疗后，定期进行HIV-1病毒载量

检测，可判断抗病毒药物治疗的疗效。病毒载量结果动态分析，对决定是否继

续使用原定的治疗方案以及是否需要更改治疗方案起到重要作用。一般启动抗

病毒治疗6个月后应进行病毒载量检测，以监测治疗效果，每年应检测一次。

治疗前进行检测可了解病人的病毒载量基线，有助于评价治疗后效果。如适时

重复检测病毒载量，没有低于检测限，需要考虑治疗是否失败。此外，HIV-

1DNA定量检测可判定HIV储存库含量，可更准确预测HIV传播风险和病程进展。

HIV-1DNA定量高者，传播风险的可能性高，病程进展快而严重，DNA定量测定

为进一步疗效评价提供新的技术手段。

3HIV核酸检测实验室要求

HIV核酸检测应在符合要求的实验室中进行，应制定严格的管理制度和建

立与实验和实验室管理相关的标准操作程序。实验人员必须充分了解并严格遵

守各项规定和掌握操作技能，并严格遵照执行。核酸定性、定量检测要严格满

足分子生物学实验室的要求。

3.1实验室的设计及工作基本原则

HIV核酸检测实验室设计及实验室的基本工作原则应符合《医疗机构临床

基因扩增检验实验室管理办法》附件中“医疗机构临床基因扩增检验实验室工

作导则”和《HIV-1病毒载量测定及质量保证指南》的要求。

3.2实验室人员和要求

进行HIV核酸检测的人员需具有艾滋病核酸检测的上岗资格，接受过市级

以上的实验操作技术培训及相关技术设备及检测产品提供商的培训，并接受过

实验室生物安全培训。

3.3实验室生物安全

实验室的安全工作制度或安全标准操作程序，所有操作符合《实验室生物

安全通用要求》（GB19489-2008）。

4HIV-1核酸检测方法及程序

HIV核酸检测分为定性和定量试验。HIV核酸定性检测主要采用实时荧光定

量PCR方法，HIV核酸定量检测主要基于靶核酸扩增和信号放大两种方法。定

性和定量检测均可用作HIV感染诊断，定量检测还可用于抗病毒治疗效果监测。

4.1HIV-1核酸定性检测

4.1.1方法：HIV-1核酸定性检测包括RNA检测和DNA检测。RNA检测主要是

检测血浆或血清中的RNA，DNA检测主要是检测全血、干血斑或组织细胞中的前

病毒DNA或总核酸。二者相比，HIV-1DNA检测的稳定性更好。

目前，HIV核酸定性检测主要有实时荧光定量PCR方法、荧光探针PCR法

及以焦磷酸化激活聚合酶（PAP）反应为基础的核酸扩增PCR方法。

4.1.2试剂：必须是经国家药品监督管理局注册、在有效期内的试剂。严格按

产品说明书操作。

4.1.3结果判定与报告：检测结果显示“有反应”或“检测到”，报告本次核

酸阳性；检测结果显示“无反应”或“未检测到”，报告本次核酸阴性。