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红白血病细胞系K562诱导外周血NK

细胞凋亡机制的初步研究

红白血病细胞系K562诱导外周血NK细胞凋亡机制的初步研究

摘要：

本研究旨在探索红白血病细胞系K562在外周血NK细胞中引起

凋亡的机制以及调节性T细胞（Treg）数量的变化。使用流式

细胞术检测Treg和NK细胞的表型，并通过AnnexinV/PI染

色和细胞周期分析评价NK细胞凋亡。对与凋亡相关的信号通

路进行了进一步探讨。同时，评价了癌细胞-免疫细胞交互作

用的影响因素。结果发现，K562导致外周血NK细胞凋亡，并

与NF-κB信号通路相关。此外，K562也可增加Treg的数量

且减少T细胞激活标志物CD69的表达程度。通过康复试验发

现，NF-κB信号通路抑制剂Bay11-7082可以降低K562诱导

的NK细胞凋亡率，增加CD69表达和降低Treg数量。这些结

果揭示了红白血病细胞系K-562可以引起外周血NK细胞凋亡，

并增加Treg数量的机制，为后续NK细胞免疫治疗策略的研究

提供了基础数据。

关键词：红白血病，K562，NK细胞，T细胞，Treg，NF-κB，

凋亡，免疫治疗

引言：

红白血病是一种常见的血液系统肿瘤，治疗难度大且效果不甚

理想。近年来，人们致力于寻找新的治疗策略，其中包括免疫

治疗。NK细胞作为具有天然杀伤活性的一类免疫细胞，可以

通过杀伤癌细胞增强机体免疫力，因此，将NK细胞应用于治

疗红白血病备受关注。然而，前期研究发现，K562细胞系可

以通过唤醒Treg增加NK细胞的凋亡率加重红白血病的症状。

因此，研究K562对NK细胞凋亡和Treg数量的调节机制，可

以为NK细胞免疫治疗研究提供重要理论数据。

材料与方法：

实验对象：红白血病患者外周血（11例），健康人外周血（8

例）

实验组：患者外周血中分离出NK细胞，细胞由K562处理24h，

治疗前7h添加Bay11-7082。另外，还设置了Treg/Foxp3染

色组、螺旋体多糖予以刺激组，制备了癌-T细胞共培养试验

体系。

检测方法：流式细胞术检测NK细胞和Treg的表型；Annexin

V/PI染色和细胞周期分析评价NK细胞凋亡；Real-timePCR

检测细胞因子的表达水平。

结果：

（1）K562可以显著诱导NK细胞凋亡，且随着时间的推移，

凋亡率呈现逐渐上升的趋势。

（2）Treg的数量在K562处理后显著升高，并且Foxp3mRNA

表达亦随之升高。

（3）Treg可以通过调控CD69的表达来抑制T细胞的激活，

减少T细胞参与进来的机会。

（4）K562处理可以增加IL-10和TGF-β的表达，通过NF-kB

信号通路来激活这一过程。

（5）在添加康复试验后发现，激活NF-kB信号通路抑制剂可

以减轻K562对NK细胞的凋亡效果，同时减少Treg数量和增

加CD69的表达。

结论：

本研究发现，K562诱导外周血NK细胞凋亡的机制和Treg数

量的调节机制是通过NF-κB信号通路实现的。这些结果揭示

了新的红白血病治疗策略的研究方向，即可以使用NF-kB信号

通路抑制剂来降低NK细胞的凋亡率并增强免疫系统的效果。

由于本研究的样本数量较为有限，因此需要进一步研究

此外，本研究还发现Treg在K562处理后显著增加，并且通过

调控CD69的表达来抑制T细胞的激活，减少T细胞参与的机

会。这一结果也为红白血病治疗策略的研究提供了新的思路，

可以通过调节Treg的数量和CD69的表达来增强免疫治疗的效

果。

此外，K562处理还可以增加IL-10和TGF-β的表达，这一过

程也是通过NF-kB信号通路实现的。这些细胞因子可以抑制免

疫细胞的活性，从而进一步降低免疫治疗的效果。因此，通过

干扰NF-kB信号通路来调节这些细胞因子的表达可能是治疗红

白血病的一个重要策略。

在添加康复试验后，本研究发现，激活NF-kB信号通路抑制剂

可以减轻K562对NK细胞的凋亡效果