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血液样本采集和血涂片制备
1、抽血时针栓只能外抽,不能内推,以免静脉内注入空气形
成气栓,造成严重后果。
2、属于酸性染料的是:伊红属于酸性染料,通常为钠盐,有
色部分为阴离子。
3、疟原虫检查常用的染色方法是:吉姆萨染液对细胞核、
寄生虫(如疟原虫等)找色较好,结构更清晰,但对细胞质
的着色能力略差。
4、手工推片法,推片与载玻片的夹角为25°~30°。
5、血液黏度与血细胞比容和血浆黏度有关,其中,血浆黏度
受血浆中纤维蛋白原、球蛋白等大分子蛋白质的影响,它们
的浓度越高,血浆黏度越高。
6、涂片瑞氏染色时,缓冲液常用的pH为6.4~6.8。
7、瑞氏染料是由酸性染料伊红和碱性染料亚甲蓝(又名美
蓝)组成。染色原理既有物理的吸附作用,又有化学的亲和
作用。血红蛋白、嗜酸性颗粒为碱性蛋白质,与酸性染伊红
结合,染粉红色;细胞核蛋白、淋巴细胞、嗜碱性粒细胞胞
质为酸性,与碱性染料亚甲蓝或天青结合,染紫蓝色或蓝色;
中性颗粒呈等电状态与伊红和亚甲蓝均可结合,染淡紫红
色;原始红细胞、早幼红细胞胞质、核仁含较多酸性物质,
染成较浓厚的蓝色;中幼红细胞既含酸性物质,又含碱性物
质,染成红蓝色或灰红色;完全成熟红细胞,酸性物质彻底
消失后,染成粉红色。瑞氏染色法是最经典、最常用染色法。
8、瑞氏染料亚甲蓝容易氧化为一二三甲基硫堇等次级染料
(即天青)。将适量伊红、亚甲蓝溶解在甲醇中,即为瑞氏
-+
染料,由酸性染料伊红(E)和碱性染料亚甲蓝(M)组成。
Ⅱ液磷酸盐缓冲液pH为6.4~6.8。在偏碱性环境中负电荷
增多,易与亚甲蓝结合,所有细胞呈灰蓝色,颗粒呈深暗,
嗜酸
颗粒呈暗褐,甚至棕黑色,中性颗粒偏粗,呈紫黑色。
9、细胞各种成分均属蛋白质,由于蛋白质系两性电解质,所带
电荷随溶液pH而定,在偏酸环境中正电荷增多易与伊红结合染
色偏红;在偏碱环境中负电荷增多易与亚甲蓝或天青结合偏蓝。
因此,细胞染色对氢离子浓度十分敏感,所以在瑞氏染色中缓冲
液起到恒定pH作用。
10、染色原理:既有物理的吸附作用,又有化学的亲和作用。
各种细胞成分化学性质不同,对各种染料的亲和力也不一样。
11、血清与血浆的差别是:血清中缺少某些凝血因子,如凝血因
子Ⅰ(纤维蛋白原)、凝血因子Ⅱ(凝血酶原)、凝血因子Ⅴ、
凝血因子Ⅷ等。
12、正常成人血量约为(70±10ml)/kg体重,成人4~5L,占
体重的6%~8%,其中血浆占55%,血细胞占45%。
13、全血由血细胞和血浆组成;血浆为全血除去血细胞部分,除
钙离子外,含有其他全部凝血因子;血清是离体后的血液自然凝
固后析出的液体部分,除纤维蛋白原等凝血因子在凝血时消耗
外,其他成分与血浆基本相同。
14、涂片瑞氏染色时,缓冲液常用的pH为6.4~6.8。
15、很多因素影响血涂片时血膜的厚度,血滴大、血黏度高、推
片角度大、速度快则血膜厚,反之则血膜薄。
16、引起血涂片分布不均的主要原因有:推片边缘不整齐,用力
不均匀,载片不清洁。
17、疟原虫、微丝蚴检查,采用厚血膜涂片法。
18、红细胞沉降率测定时,抗凝剂与血液的比例为1:4。
19、肝素能加强凝血酶Ⅲ灭活丝氨酸蛋白酶,从而阻止凝血酶形
成。过量肝素可引起白细胞聚集合血小板减少,均不适合白细胞
分类和血小板计数,更不适用于止血学检验,但是红细胞渗透脆
性试验的理想抗凝剂。每毫升血液的肝素用量为10.0~12.5IU,
多为肝素钠盐或钾盐
20、血液由血细胞和血浆组成,将抗凝的全血离心后除去血细胞
成分即为血浆。
21、双草酸盐抗凝剂可用于血细胞比容、CBC、网织红细胞计数
等项目检查,但其可使血小板聚集,影响白细胞形态,不适用于
血小板计数、白细胞分类计数。
22、枸橼酸盐:常用有枸橼酸钠,能与血液中钙离子结合形成螯
合物,阻止血液凝固。
23、肝素:加强抗凝血酶(AT)灭活丝氨酸蛋白酶作用,阻止凝
血酶的形成,并阻止血小板聚集等作用,从而阻止血液凝固。
24、血液常规分析所用的抗凝剂:EDTA-K2。临床上常用
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