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豚鼠白介素2elisa检测试剂盒试剂盒的组成和操作步骤

豚鼠白介素2elisa检测试剂盒的试剂盒的组成：

 组成：

 （1）结合物及标本的稀释液；

 （2）洗涤液，在板式ELISA中，常用的稀释液为含0.05%吐温20磷酸缓冲

盐水；

 （3）酶标记的抗原或抗体（结合物）；

 （4）酶的底物；

 （5）阴性对照品和阳性对照品（定性测定中），elisa试剂盒参考标准品和控

制血清（定量测定中）；

 （6）已包被抗原或抗体的固相载体（免疫吸附剂）

 豚鼠白介素2elisa检测试剂盒的操作步骤1.加样：分别设标准孔、待测样品

孔、空白孔。设标准孔7孔，依次加入100mu;L不同浓度的标准品（见

试剂准备2）。空白孔加100mu;L（见试剂准备第二步*后一管），余孔加待

测样品100mu;L，酶标板加上覆膜，37℃温育2小时。2.弃去液体，甩

干，不用洗涤。3.每孔加检测溶液A工作液100mu;L（临用前配制），酶标

板加上覆膜，37℃温育1小时。4.弃去孔内液体，每孔用300mu;L的洗涤

液洗涤，浸泡1-2分钟，吸去（不可触及板壁）或甩掉酶标板内的液体，

实验台上铺垫几层吸水纸，酶标板朝下用力拍几次（也可轻拍将孔内液体拍

干），重复洗板3次。*后一次洗涤后，要把孔内的洗涤液完全甩干。自动洗

板机亦可。5.每孔加检测溶液B工作液（临用前配制）100mu;L，加上覆

膜，37℃温育1小时。6.弃去孔内液体，甩干，洗板5次，方法同步骤4。

7.每孔加底物溶液90mu;L，酶标板加上覆膜，37℃避光显色（反应时间控

制15-25分钟，不要超过30分钟。当标准孔的前3-4孔有明显的梯度蓝

色，后3-4孔梯度不明显时，即可终止）。8.每孔加终止溶液50mu;L，终止

反应，此时蓝色立转黄色。终止液的加入顺序应尽量与底物溶液的加入顺序相

同。如出现颜色不匀一，请轻轻晃动酶标板以使溶液混合均匀。9.在确保酶标

板底无水滴及孔内无气泡后，立即用酶标仪450nm波长测量各孔的光密度

（O.D.值）。

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