中药-细胞工程.pptx

细胞正程

学习要求

·细胞工程

·植物次生代谢产物·植物组织培养

·单克隆抗体技术·体细胞克隆

·干细胞研究

·上一章我们介绍了基因工程，它是在分子水平上对遗传物质DNA分子进行操作，而细胞工程(cellengineering)是在细胞水平上研究、开发、利用各类生物细胞的生物工程技术，它是现代生物技术的重要组成部分。

引言

·以生物细胞为基本单位，按照人们需要和设计，在离体条件下进行培养、繁殖或人为的精细操作，使细胞的某些生物学特性按人们的意愿发展或改变，从而改良品种或创造新种、加速繁育生物个体、获得有用物质的过程统称为细胞工程。

·目前，细胞工程的主要工作领域包括：①动、植物细胞和组织培养；②体细胞杂交；③细胞代谢物的生产；④细胞拆合与克隆等。

第一节细胞工程基础

一、细胞工程的概念

·体细胞杂交(somaticcellcrossbreeding)又称细胞融合，它是指在一定的条件下，利用化学的或物理的方法，使不同来源的体细胞原生质体结合并增生或形成新生物体的过程。

2.细胞核移植

·细胞核移植是细胞工程中细胞拆合的重要内容之一，它通常是借助显微操作仪，在显微条件下用微吸管把一个细胞中的细胞核吸出直接移入到另一个去核的细胞中，培养发育成无性繁殖系。

二、细胞工程基础知识

1.体细胞杂交

·1.叶绿体移植叶绿体是植物细胞所特有的能量转换细胞器，其主要功能是进行光合作用。如果把高光效作物(如玉米、高粱)的叶绿体移植到低光效作物(如小麦、水稻等)的原生质体中，就能提高其光合效率，从而达到增产的目的。

·2.线粒体移植线粒体是动植物细胞中普遍存在的一种半自主的细胞器，是呼吸作用的中心，它在生物的能量转化中起重要的作用，同时也与某些性状的遗传有直接关系。线粒体的转移，可以传递遗传信息，改变受体细胞的某些遗传特征，如抗药性、雄性不育特性等。

3.细胞器移植

·植物组织培养(tissuecultureofplant)技术即把植物的细胞、组织或器官等在无菌条件下植入到培养基上，使其在人工控制条件下进行生长和发育的技术。

4.植物组织培养

·在生物学术语里，克隆是指从同一个细胞或个体以无性繁殖方式产生一群细胞或一群个体，

在不发生突变的情况下，具有完全相同的遗传性状，常称无性繁殖(细胞)系；其动词指在生物体外用重组技术将特定基因插入载体分子中，即分子克隆技术。克隆的本质特征是生物个体在遗传组成上的完全一致性；

5.细胞克隆技术

三、细胞工程基本操作技术

1.无菌操作技术

2.细胞培养技术

3.细胞融合技术

洗涤室

●灭菌室

配制室

无菌操作室

培养室

鉴定室

驯化移植室

1、植物细胞工程实验室的组成

2、基本设备

·玻璃器皿和器械·无菌操作设备

·培养设备

·其它设备

图2-3植物组织培养用的各种玻璃器皿

1.T形管2.L形管3.三角形培养瓶4.长方形扁瓶5.圆形扁瓶6.圆形培养瓶7.三角瓶

8.平型有角试管9.平型无角试管10.细胞室培养工具

2

4

8

3

10

HIs20

6

各种镊子剪刀解剖刀接种针

图1-2植物组织和细胞培养用器械

二、无菌操作

1、各种灭菌方法及其适用范围

·加压蒸汽灭菌法最常用的方法，是把待灭菌的物品放在一个可密闭的加压蒸汽灭菌锅中进行的。在每平方厘米为一个大气压(即15磅时)的压力下，温度可达120℃,一般只要持续15—20分钟后，就可杀死一切微生物的营养体和它们的各种孢子。由于加压蒸汽灭菌是通过提高蒸汽压力而使其升高温度以杀死微生物的，所以，该法只有当灭菌锅内的空气完全排尽后才能达到最佳效果。

B干热灭菌法是在可保持恒温的电烘箱中进行的，又称热空气灭菌；它适用于各种耐热的玻璃空器皿(如培养皿、吸管等)和某些其它物品(如石蜡油)的灭菌，一般在160℃温度下，持续一个小时，就可达到灭菌的目的。

C过滤灭菌法是指将带菌的液体或气体通过一个称作滤器的装置，位杂菌受到机械的阻力而留在滤板上，从而达到除菌的目的。此法常用于不宜作湿热灭菌的培养液的除菌。

其它灭菌方法

D熏蒸灭菌法E药剂灭菌法F灼烧灭菌法G照射灭菌法

A清洗

玻璃器皿的清洗

实验材料的清洗

B灭菌

※培养材料的灭菌

以药剂灭菌法为主

主要考虑：药剂的灭菌效果、材料对