有哪些信誉好的足球投注网站- 1、本文档共5页，可阅读全部内容。
- 2、有哪些信誉好的足球投注网站（book118）网站文档一经付费（服务费），不意味着购买了该文档的版权，仅供个人/单位学习、研究之用，不得用于商业用途，未经授权，严禁复制、发行、汇编、翻译或者网络传播等，侵权必究。
- 3、本站所有内容均由合作方或网友上传，本站不对文档的完整性、权威性及其观点立场正确性做任何保证或承诺！文档内容仅供研究参考，付费前请自行鉴别。如您付费，意味着您自己接受本站规则且自行承担风险，本站不退款、不进行额外附加服务；查看《如何避免下载的几个坑》。如果您已付费下载过本站文档，您可以点击 这里二次下载。
- 4、如文档侵犯商业秘密、侵犯著作权、侵犯人身权等，请点击“版权申诉”（推荐），也可以打举报电话：400-050-0827(电话支持时间：9:00-18:30)。
- 5、该文档为VIP文档，如果想要下载，成为VIP会员后，下载免费。
- 6、成为VIP后，下载本文档将扣除1次下载权益。下载后，不支持退款、换文档。如有疑问请联系我们。
- 7、成为VIP后，您将拥有八大权益，权益包括：VIP文档下载权益、阅读免打扰、文档格式转换、高级专利检索、专属身份标志、高级客服、多端互通、版权登记。
- 8、VIP文档为合作方或网友上传，每下载1次， 网站将根据用户上传文档的质量评分、类型等，对文档贡献者给予高额补贴、流量扶持。如果你也想贡献VIP文档。上传文档
1)细胞膜荧光抗体标记标准操作规程
①取上样管标记病人编号和所标记的所有抗体名称和荧光素，按
标号加入100ul血样。
②按照上样管标记分别加入对应的荧光抗体（一般抗体为
20ul/100ul血，PE-Cy5和ECD标记抗体一般为10ul/100ul），
室温避光反应15min。
③加入2ml溶血剂，避光室温溶血10min~15min，目测血样呈透
明的淡红色，1500rmp离心5min，去上清。
④加入2mlPBS或生理盐水离心留沉淀物，洗涤两次。
⑤加入1mlPBS或者生理盐水重悬细胞，准备上样。
注意事项：
加入血样和抗体前，须注意编号和血样及抗体的一致性。
实验室要注意冬天保温，夏天降温，防止室温过低或过高，影
响抗原抗体反应。
溶血时，溶血剂和血样的比例为50:1，当血样体积发生变化时，
注意溶血剂体积的变化。
2)细胞膜kappa/lambda荧光抗体标记标准操作规程
①取上样管标记病人编号和所标记的所有抗体名称和荧光
素，按标号加入100ul血样。
②加入2ml溶血剂，避光室温溶血10min~15min，目测血样
呈透明的淡红色，1500rmp离心5min，去上清。
③加入2mlPBS或生理盐水离心留沉淀物，洗涤三次
④沉淀物中按上样管标记分别CD45-PE-CY5和kappa/lambda
试剂盒和同型对照，避光反应15~30min
⑤加入2mlPBS或生理盐水离心留沉淀物，洗涤两次
⑥保留沉淀物种加入1mlPBS或者生理盐水，准备上样。
注意事项：
沉淀物中的液体不能留太多，控制保留液体体积，保证抗体效
价
溶血判断请参照细胞膜荧光抗体标记标准操作规程
3)细胞内荧光抗体标记标准操作规程
①取上样管标记病人编号和所标记的所有抗体名称和荧光
素，按标号加入100ul血样。
②按照上样管标记分别加入对应的包膜荧光抗体（一般抗体
为20ul/100ul血，PE-Cy5和ECD标记抗体一般为
10ul/100ul），室温避光反应10min。
③加入破膜剂试剂盒A液100ul剧烈震荡混匀，避光固定
10min
④加入约4ml（2/3上样管液体），1500rpm离心5min，去上
清
⑤沉淀物首先剧烈震荡混匀，然后小心加入破膜剂试剂盒B
液100ul，不得震荡和剧烈摇晃，避光反应5min
⑥加入上样管所标记对应的胞内荧光抗体，避光反应15min
⑦加入约4ml（2/3上样管液体），1500rpm离心5min，去上
清
⑧重复步骤7两次，加入1mlPBS或者生理盐水，准备上样。
注意事项：
膜标记抗体参照细胞膜荧光抗体标记标准操作规程
加入破膜剂试剂盒B液以后严禁震荡和吹打
4)PNH荧光抗体标记标准操作规程
①取上样管标记病人编号和所标记的所有抗体名称和荧光素
（每个病人两管，一管染色红细胞，一管染色粒细胞），按
标号加入100ul（粒细胞管）血样和5ul（红细胞管，直接
加入5ulCD59抗体，避光反应15min）血样。
②（以下步骤都是粒细胞管）加入2ml溶血剂，避光室温溶
血10min~15min，目测血样呈透明的淡红色，1500rmp离
心5min，去上清。
③加入2mlPBS或生理盐水离心留沉淀物，洗涤两次
④沉淀物中按上样管标记分别CD45-PE-CY5、CD55和
CD59，避光反应15~30min
⑤加入2mlPBS或生理盐水离心留沉淀物，洗涤两次，加入
文档评论（0）