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血尿液肌酐Cr测定作业指导书
1.实验原理
VitrosCREA试剂是一种干燥,多涂层的,在透
明的聚合物支撑基片上涂有分析成份的化学干片。
将一滴患者样品滴于干片上,分布层会使之均匀
地分布。随后,肌酐扩散至试剂层并水解为肌酸。这
样生成的肌酸在肌酸氨基水解酶的作用下转化为肌氨
酸和尿素。肌氨酸又在肌氨酸氧化酶的作用下氧化生
成甘氨酸,甲醛和过氧化氢。最后,过氧化氢催化白
色染料生成呈色剂。
测定方式:两点比色法
波长:670nm
测试时间和温度:37℃约5分钟
反应过程:
肌酐氨基水解酶
肌酐+水————→肌酸
肌酸氨基水解酶
肌酸+水———→肌氨酸+尿素
肌氨酸氧化酶
肌氨酸+氧气+水————→甘氨酸+甲醛
+过氧化氢
POD
过氧化氢+白色染料————→呈色剂
2.标本:
2.1病人准备:无特殊。
2.2样品类型:血清;肝素锂/钠和EDTA抗凝血浆。
定时收集的,稀释后的尿样。
2.3标本采集与处理:
2.3.1血清和血浆样品
特别要注意的是:不要用注射营养液的针管采集
样品。样品采集后4小时内要离心标本,吸出血清。
处理时要将其当成生物污染品。
2.3.2尿液样品定时或随时采集的尿液。测试前将1
份样品加20份试剂级别的水进行稀释。将测试结果乘
以21,就得到原始样品中尿素氮的浓度。冷藏的样品
不能立即测试。处理样品时要将其当成生物污染品。
3.标本的存放:血清、血浆室温下最多5天;冷藏
最多30天;冷冻保存可超过30天。尿液样品室温下
最多3天;冷藏最多5天;-18℃可长期保存。
4.标本的运输:样品要放在带盖的容器内以防污染
和蒸发。
5.标本拒收的标准:污染、抗凝剂、防腐剂不符合
要求,标本放置时间过长。
6.试验材料:
6.1测试Cr所需的物品包括:Vitros化学定标物
Kit1;Vitros特制质控液;Vitros7%BSA稀释液。
强生厂家提供原装进口,试剂盒外包装上标明了测试项目
名称,试剂标签代码,有效期限和储藏温度。
6.1.1试剂组成:干片成分:反应成份有肌酐氨基水解
酶,肌酸氨基水解酶,肌氨酸氧化酶,过氧化酶和白色染
料。其它成份有染色物质,粘合剂,缓冲剂,稳定
剂,表面活性剂,螯合剂及交叉连接剂。干片标记:
试剂盒外包装上标明了测试项目名称,试剂标签代码,
有效期限和储藏温度。
6.1.2试剂准备:从冰箱中取出干片盒,在将干片盒
打开封装并装入仪器内的干片储藏器之前必须使其达
到室温状态18~28℃。因此从冰箱中取出的试剂盒至
少要在室温下要放置60分钟,而冷藏的试剂盒至少要
在室温下放置30分钟。去除内包装后立即将干片盒放
入仪器的储藏器中。说明:在试剂盒达到室温后的24
小时之内必须将其装入仪器中。
6.1.3试剂稳定性与贮存
未开封的干片盒:存储在-18℃或低于该范围。
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