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内毒素去除的方法总结及注意事项
内毒素基本性质:
内毒素是革兰氏阴性细菌细胞壁中的脂多糖。内毒素只有当细菌
死亡溶解或用人工方法破坏菌细胞后才释放出来,所以叫做内毒素。
内毒素位于细胞壁的最外层、覆盖于细胞壁的黏肽上。各种细菌的内
毒素的毒性作用较弱,大致相同,可引起发热、微循环障碍、内毒素
休克及播散性血管内凝血等。
所有能引起热原反应的物质称为热原。药品中的热原主要是细菌
内毒素。一般可以认为:细菌内毒素是热原,但热原不等于细菌内毒
素。
细菌内毒素的理化性质:
耐热性:彻底灭活需250高温干烤一小时
水溶性:可溶于水,生产中可用无热原水冲洗以除去热原。
被吸附性:可被活性碳吸附
被酸碱破坏:0.1MHCl或0.1MNaOH浸泡4小时
被氧化剂破坏:30%双氧水浸泡4小时,可完全破坏
不挥发性
器皿中内毒素的去除:
1
干热法:
适用对象:耐热物品如玻璃制品、金属制品等生产过程中所用的
容器
处理方法:180℃3~4h或250℃30min~2h
注意事项:
1.在干烤前,被加热的玻璃器皿上最好不要有水珠,否则可能会
使玻璃器皿损坏。
2.烘烤结束后,玻璃器皿不要马上从电热烘箱中拿出,要等温度
适度降低之后才可以拿出,以免因温差太大而造成玻璃器皿损坏。
3.器皿上不能含有纸质或塑料制品,以免烘烤时燃烧或熔化。
2
化学降解法:
适用对象:主要用于去除玻璃、塑料和其它高分子材料器皿上的
内毒素。
处理方法:常用3~5%双氧水、重铬酸钾硫酸清洁液(重铬酸钾∶
硫酸∶水常用配比1∶1∶10或1∶2∶8)、0.1MHCl或0.1MNaOH
浸泡去除。一般处理4h以上。
注意事项:佩戴防护用具,防止皮肤直接接触。
溶液中内毒素的去除:
方法原理优点缺点
一些去污剂,如对内毒素的去除率
TritonX-114,脱高,且不影响有效
氧胆酸钠能够和内成份的活性。该法
去内毒素后的样品
毒素的脂质部分结简单高效、价格低
液相分离法会有微量去污剂的
合,通过液相分离廉、适合大规模应
残留。
的方法萃取内毒素用,在我们日常的
从而使后者有效地蛋白纯化中较为常
去除。用。
当溶液pH合适时,
内毒素带有负电
适合于溶液中存在
荷。因此内毒素与成本低,吸附容量
离子交换法其它带负电荷物质
阴离子交换介质Q大
的情况
或DEAEPurose6
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