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实验四X染色质染色、人类染色体G显带标本的制备及观察;;二、实验原理;三、实验方法;2、标本的制作
将刮取物涂在载玻片上，晾干。
3、Giemsa染色法
置入固定液(甲醇：冰醋酸3:1)中10min。
晾干，置入5mol/LHCl中，室温下水解20min。
用自来水中冲洗1min，以充分洗去HCl，以免影响染色液的pH。（这步很关键！）
Giemsa染液（现用现配）中染色约4-5min。
(Giemsa原液：磷酸盐缓冲液=1:9);4、X染色质观察
先在低倍镜下找到细胞较集中而又均匀分散的细胞群。
油镜下，X染色质是位于核膜内侧缘轮廓清楚的浓染小体。其直径约1μm～1.5μm。
一般呈平凸、圆开、扁平形或三角形。;计数50～100个细胞，统计X染色质的阳性率。
正常值：男性，低于1%；女性，高于10%;注意事项
避开含有大量细菌的区域，因为有时这些细菌会干扰X的观察。
避免与核内其它核质凝集物等混淆。凡位于核中间的浓染小体都不在计数之内。
可计数的细胞，核必须完整，无缺损，无皱褶，核染色均匀。
按上述标准计数50～100个细胞，统计性染色质的阳性率。;（二）人类染色体G显带标本的制备及观察;2、制片
烤片：常规法制作染色体标本，置60℃烘箱烘8h～10h，然后置37℃烘箱烘3d左右
预处理：将经过烘烤的片子投入0.02%胰蛋白酶溶液中，并不断摆动，2.5min左右，自来水冲洗。
染色：Giemsa染液染色8～10min，水冲洗。
镜检：空气干燥、镜检。;3、实验观察
低倍观察：先在低倍镜自上而下，自左至右地选择合适的、带纹清晰的G带中期分裂相
油镜观察：转至油镜下观察，根据每号染色体的特征予以鉴别。;正常女性G显带染色体的核型分析（46，XX）;注意事项
制片：G显带的好坏，首先取决于染色体本身制片的质量，染色体要较长，以早中期为宜，且中期相丰富、分散好，无胞浆背景。
标本保存时间：不宜太长。时间越长，细胞对胰酶处理的抵抗性越强，片龄过长的标本染色后会导致斑点状而非带纹。
胰酶温度：不高于37℃。
胰酶处理时间：不少于30秒。;实验报告
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