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未知驱动探索，专注成就专业
酶联免疫吸附（ELISA）是一种常用的实验方法，用于检测动
物体内是否存在特定抗体或抗原物质。本文将介绍动物布鲁氏
菌病ELISA竞争酶联免疫吸附的原理、步骤和应用。
1.简介
动物布鲁氏菌病是由布鲁氏菌引起的一种传染病，主要感
染牛、羊、猪等多种动物。该病对动物的健康和生产能力造成
严重影响，也对人类健康构成威胁。ELISA是一种高效、敏感、
特异性好的检测方法，广泛应用于布鲁氏菌病的诊断和研究。
2.原理
动物布鲁氏菌病ELISA竞争酶联免疫吸附的原理基于抗原
与特异性抗体之间的竞争反应。简而言之，ELISA试剂盒中包
含布鲁氏菌特异性抗原，该抗原与待检样品中的布鲁氏菌抗体
发生竞争结合。
具体步骤如下：
•第一步：将待检样品与ELISA试剂盒中的抗原结合
物共孵育，使样品中的抗体与抗原结合。
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•第二步：将试剂盒中的竞争抗体加入孵育体系，竞
争抗体与试剂盒中的抗原结合。
•第三步：将孵育体系中未结合的抗体和竞争抗体洗
掉。
•第四步：加入酶标记的二抗与抗原或竞争抗体二抗
结合形成复合物。
•第五步：加入底物使酶作用，产生可定量检测的颜
色反应。
•第六步：使用酶标仪测量底物反应的光密度，光密
度与待检样品中布鲁氏菌抗体的浓度成正比。
3.步骤
动物布鲁氏菌病ELISA竞争酶联免疫吸附通常分为以下步
骤：
3.1样品处理
收集待检样品，如血清或乳汁，根据样品特性进行适当处
理，如稀释、离心等。
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3.2试剂准备
准备ELISA试剂盒，包括抗原结合物、竞争抗体和酶标记
的二抗等。
3.3抗原结合
将待检样品与抗原结合物共孵育，使布鲁氏菌抗体与抗原
结合。
3.4竞争结合
加入竞争抗体使其与试剂盒中的抗原竞争结合，形成抗原-
抗体-竞争抗体的复合物。
3.5洗涤
使用缓冲液进行多次洗涤，去除未结合的抗体和竞争抗体。
3.6酶标记的二抗结合
加入酶标记的二抗与抗原或竞争抗体复合物结合，形成二
级抗体复合物。
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3.7底物反应
加入底物使酶作用，产生可定量检测的颜色反应。
3.8光密度测量
使用酶标仪测量底物反应的光密度，光密度与待检样品中
布鲁氏菌抗体的浓度成正比。
4.应用
动物布鲁氏菌病ELISA竞争酶联免疫吸附在布鲁氏菌病的
早期诊断和流行病学调查中广泛应用。其主要应用有：
•布鲁氏菌感染的早期诊断，提供快速和准确的结果。
•布鲁氏菌病疫苗效果评估，检测免疫动物体内是否
产生抗体。
•布鲁氏菌病的流行病学调查，筛查疫区动物群体中
是否存在布鲁氏菌感染。
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结论
动物布鲁氏菌病ELISA竞争酶联免疫吸附是一种可靠、高
效的检测方法，对早期诊断和流行病学调查具有重要意义。其
原理简单易懂，步骤简便，广泛应用于动物布鲁氏菌病的检测
和研究领域。随着技术的进一步发展，ELISA方法将在动物疾
病的预防和控制中起到更加重要的作用。
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