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基因组学与应用生物学，2016年，第35卷，第12期，第3219-3223页

GenomicsandAppliedBiology,2016,Vol.35,No.12,3219-3223

研究报告

ResearchReport

沉默MDR1基因表达逆转肺癌A549/DDP细胞对顺铂的耐药性

*

肖越邵淑丽李鹏辉张伟伟孙婴宁孙新迪

齐齐哈尔大学生命科学与农林学院,齐齐哈尔,161006

*通讯作者,shshl32@163.com

摘要本研究以A549/DDP细胞为实验对象，利用shRNA(shorthairpinRNA)沉默MDR1基因，逆转人肺

癌A549/DDP细胞对顺铂的耐药性。构建3种靶向MDR1基因重组干扰载体，稳定转染A549/DDP细胞，

qRT-PCR检测MDR1mRNA表达水平，Westernblotting检测MDR1蛋白表达水平，MTT法检测细胞对顺

铂的敏感性。结果显示成功构建了3种靶向MDR1的重组表达载体p2.1-1、p2.1-2和p2.1-3。3种干扰表达

载体均能有效沉默A549/DDP细胞MDR1基因表达，其中p2.1-3对MDR1沉默效果最好，对mRNA和蛋

白的沉默效率分别为51.47%和53.24%。转染p2.1-3的细胞对顺铂的IC50由(72.08±7.00)μmol/L降至(31.89±

3.39)μmol/L，逆转率达到(67.60±5.70)%。这些结果表明靶向MDR1的重组干扰载体均能够有效抑制MDR1

表达，其中p2.1-3干扰效果最佳并且能逆转A549/DDP细胞对顺铂的耐药性。

关键词A549/DDP细胞,MDR1,RNAi,多药耐药

SilencingMDR1GeneExpressionIncreasestheSensitivityofLungCancer

A549/DDPCellstoCisplatin

XiaoYueShaoShuli*LiPenghuiZhangWeiweiSunYingningSunXindi

CollegeofLifeSciencesandAgricultureandForestry,QiqiharUniversity,Qiqihar,161006

*Correspondingauthor,shshl32@163.com

DOI:10.13417/j.gab.035.003219

AbstractInthisstudy,weusedA549/DDPcellsasexperimentalsubjects,andusedshRNA(shorthairpinRNA,

shRNA)silenceMDR1genetoreversethedrugresistanceofhumanlungcancerA549/DDPcellstocisplatin.We

constructedthreetargetingMDR1genesrecombinantinterferencevector,stablytransfectedA549/DDPcells,used

qRT-PCRtodetectthemRNAexpressionlevelofMDR1,usedWesternblottingtodetecttheproteinexpressionlevel

ofMDR1,andusedMTTtodetectthesensitivityofcellstocisplatin.Theresultsshowedthatwesuccessfullycon-

structedthreerecombinantexpressionvectorsp2.1-1,p2.1-2andp2.1-3oftargetingMDR1gene.Thesethreeinte-

rferenceexpressionvectorsallcouldeffectivelysilencetheMDR1geneexpressionofA549/DDPcells.Amongthem,

p2.1-3hadthebests