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流式细胞仪实验方法及常见问题
分析
中心实验室李琳
2021.09.19
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•流式细胞仪〔FlowCytometer〕是集多种
技术为一体的新型高科技仪器。
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•流式细胞(flowcytometry,FCM)是以流
式细胞仪为检测手段，对处在快速直线
流动状态中的细胞或生物颗粒同时进行
多参数定量分析和分选的高新技术。
•研究对象：各种细胞、微生物、人工合
成微球等。
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BDFACSAria
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•中心实验室的流式能做什么？
•流式实验需要做哪些准备和工作？
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流式细胞仪检测范
细胞结构细胞功能
细胞大小特异性抗原（细胞表面/胞浆/核）
细胞粒度细胞活性
细胞表面面积细胞因子
核浆比例酶活性
DNA含量与细胞周期激素结合位点
RNA含量细胞受体
蛋白质含量凋亡
染色体分析
Ø在上述信号根底上的细胞分选〔未开展分选〕
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单细胞标本的制备
FCM
实标记荧光抗体
验
流检测〔老师〕
程
数据分析
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一、单细胞标本的制备
〔关键步骤〕
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6种标本来源
①外周血单细胞悬液制备
Ø新鲜的外周血是天然的单细胞悬液，需
要用红细胞裂解液裂解RBC。
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②培养细胞的单细胞悬液制备
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③脱落细胞的单细胞悬液制备
脱落细胞应去除取材伴随的杂质后再制备
细胞悬液。
对临床诊断和治疗很有意义，比方脱落的
肺泡细胞。
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④新鲜实体组织单细胞悬液制备
常用方法：酶消化法、机械法、化学处理法、
外表活性剂处理法等。
不管哪种方法都不可防止会对细胞外表膜结构、
细胞活性和功能造成不同程度的损伤。
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⑤活检标本单细胞悬液制备
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