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第三章细胞的代谢第二节酶是生物催化剂(第2课时)14:33:45
酶是在细胞内的温和条件下发挥作用的,那么在高温、低温、强酸或强碱条件下,其催化作用是加强还是减弱呢?酶的作用条件14:33:45
大多数的酶都是蛋白质,所以有很多的因素会影响它的活性。影响因素PH,也就是酸碱度温度某些化合物,如重金属等三、酶的催化功能受多种条件的影响14:33:45
实验原理:酶通常在一定的pH范围内起作用,超过这个范围,酶将失活。在这个有限的pH范围内,酶的活性会随环境中pH的变动而改变,在某一pH值下作用最强。活动:探究PH对过氧化氢酶的影响14:33:45
自变量:因变量:因变量检测指标:无关变量:实验目的:本实验以过氧化氢酶为代表研究pH对酶活性的影响,并确定过氧化氢酶的最适pH范围。酶2H2O2=2H2O+O2↑不同pH的缓冲液过氧化氢酶的活性相同反应时间内产生的氧气的量温度、底物浓度、酶浓度14:33:45
方法步骤14:33:45
3.将2片含有酶的滤纸片小心放入反应小室的一侧内壁上,使滤纸片粘在内壁上。注意滤纸片不要碰到反应小室的瓶口。1.将水槽中的水加至快满为止。2.将大小相同的8片滤纸片放在培养皿里的鲜肝匀浆中(含过氧化氢酶)浸泡1min,然后用镊子夹起滤纸片,靠在培养皿壁上,使多余的匀浆流尽。14:33:45
4.反应小室稍立起,使贴有滤纸片的一侧在上面,小心加入pH5.0的缓冲液2mL,然后再加入2mL3%的H2O2溶液,切勿使上述混合液接触到贴在内壁上的滤纸片。将小室塞紧。2ml实验开始前反应小室的状态14:33:45
5.将25mL量筒横放于盘中使之灌满水,若有气泡,将其轻轻倾斜,小心赶出气泡。将量筒倒立,使筒口一直处于水中。6.小心将反应小室平放在盘中的水里,注意反应小室贴有滤纸片的内壁应在上面,将量筒移至反应小室口上伸出的玻璃管上方,实验过程中要一直扶着量筒,保证量筒的位置不动。14:33:45
7.将反应小室小心旋转180。,使H2O2溶液接触滤纸片。同时开始计时,分别在0.5min和1min时,读取量筒中水平面的刻度并作好标记,然后记录。8.反复冲洗反应小室后,重复上述实验过程,测量在pH6.0、pH7.0、pH8.0下过氧化氢在酶的催化下所释放的气体量。注意:所有的实验都要保证实验用品不混淆,不应该有上一次反应后的剩余溶液。每次实验后,先用水充分冲洗反应小室,然后用相应缓冲液再冲洗一遍。9.记录实验结果。2ml实验开始后反应小室的状态14:33:45
过氧化氢酶在最适pH(7.0)时,活性最强,低于最适pH时,随pH升高酶活性升高,高于最适pH时,随pH升高酶活性下降。实验结论:酶通常在一定PH范围内才起作用,而且在某一PH下作用最强,称这一PH为酶的最适PH实验结果:pH在接近7.0时,收集的气体量最多;低于或高于7.0时,收集的气体量减少。14:33:45
酶的名称最适PH过氧化氢酶(肝)6.8唾液淀粉酶6.8脂肪酶8.3胰蛋白酶8.0~9.0胃蛋白酶1.5~2.2根据不同酶的特性,最适PH范围可能很窄,也可能较宽,这取决于不同酶的特性。14:33:45
最适PH值v/mmol.s-10酶的活性受PH值的影响不同的酶最适的pH值不同;每一种酶在其最适的pH值时活性最强反应速率尝试绘制坐标图像表示pH值对酶活性的影响14:33:45
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