【微生物检验】形态学检查对细菌鉴定的导航作用.docx

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【微生物检验】形态学检查对细菌鉴定的导航作用

细菌鉴定的原则之一就是用最少的试验完成鉴定。细菌形态学检查

是最基本、简单、快速的常规鉴定方法。细菌形态学包括细菌细胞形态

学和细菌菌落形态学。细菌形态学正确描述依赖于方法、培养基、培养

时间、染色试剂等,培养基和培养时间不同会影响细菌的形态。下面是

yjbys小编为大家带来的关于形态学检查对细菌鉴定的导航作用的知

识,欢迎阅读。

?1菌落特征观察

?细菌在固体培养基表面生长形成菌落。对菌落进行描述应包括菌

落大小(分大、中、小,以1mm为界)、形状、高度、边缘、表面状

态、密度(透明度)、硬度(用接种环刮取菌落时的感觉)、菌落内部结

构、颜色、光泽以及与培养基表面的黏附程度,还应包括菌落的溶血、

气味和色素产生情况等特性。观察菌落特征的目的是为了对细菌进行初

步鉴定。有些特征是某些细菌所特有的,具有属或种的鉴别价值,如肺

炎链球菌在绵羊血琼脂平板上的脐窝状菌落(如图1所示)、伴放线凝集

杆菌菌落特殊的内部结构(如图2所示)、侵蚀艾肯菌的斗笠样菌落、斯

氏假单胞菌皱纹样菌落、变形杆菌迁徙样菌落、铜绿假单胞菌的水溶性

色素、紫色色杆菌的脂溶性色素(如图3所示)、粘质沙雷菌的红色色素

(如图4所示)、产吲哚金黄杆菌产生的吲哚气味、嗜血杆菌产生的鼠穴

气味、诺卡菌产生的腐土气味、厌氧菌产生的腐氨气味、荧光假单胞菌

产生的黄色荧光素、某些厌氧菌可产生砖红色荧光素等。有些细菌产生

色素受到气体的影响(粘质沙雷菌在厌氧环境下不产色),有些细菌产生

色素受到光线的影响(某些快速生长分枝杆菌是光产色或暗产色)。

?对细菌菌落特征的观察和描述是细菌鉴定的第一步骤,其主要目

的体现在以下几方面。

?1.1病原菌定量或半定量在对标本进行定量或半定量接种后,

通过菌落计数可获得定量或半定量结果,细菌的定量在尿液分析和疗效

动态观察中具有临床意义,半定量适用于开放性标本的结果分析(确定

优势菌)。

?1.2确定病原菌开放性标本受炎症组织周围皮肤、黏膜的常居

菌丛污染的可能性较大,观察培养结果时应根据标本直接涂片镜检结

果,结合菌落形态特征来确定病原菌。

?1.3解释血培养镜检结果分析阳性血培养瓶的转种结果时,应

结合对阳性培养液直接涂片的镜检结果,如果涂片结果与培养结果不

符,应考虑操作错误或是污染所致。

?1.4确定鉴定方向根据不同培养基上的菌落形态特征,结合革

兰染色镜检结果及快速辅助试验(氧化酶、触酶、凝固酶等)结果,可确

定鉴定方向。

?2菌体形态观察

?革兰染色细胞形态学是细菌分类学的基础,临床微生物学实验室

仍然使用细胞形态学的方法进行细菌鉴定,掌握细胞形态学的标准方法

能够为准确鉴定细菌提供可靠保证。对细菌菌体形态特征的观察和描述

是细菌鉴定的第二步骤,其主要目的体现在以下几方面。

?2.1解释培养结果、确定鉴定方向无论是液体培养(如血培养、

标本直接增菌培养)或是固体培养(接种琼脂平板),都应该将培养物进行

涂片、染色镜检确定培养物的性质,即可快速报告,也是为下一步的鉴

定指明方向。图5所示为血培养阳性培养物涂片革兰染色镜检结果。

?2.2鉴别细菌的手段细菌菌体形态结合菌落形态特征可对细菌

进行鉴别。例如,在选择性巧克力平板(加万古霉素)上生长的草绿色溶

血菌落,是乳杆菌还是肠球菌(VRE)只要涂片镜检就很容易区分;鲍曼不

动杆与克雷白菌属细菌的菌落形态相似,区别在于前者为革兰阴性球杆

菌(接近球菌),后者为革兰阴性杆菌;丹毒丝菌在血平板上的菌落形态与

草绿色链球菌很相像,但镜下形态差别很大。图6所示为红斑丹毒丝菌

的革兰染色镜下形态。

?2.3鉴定方向及试剂选择的依据葡萄球菌和链球菌、革兰阳性

球菌和革兰阳性杆菌、革兰阴性球菌和革兰阴性杆菌的鉴定方向均不

同,鉴定试剂选择也不同。

?2.4药敏组合选择的依据CLSI文件规定,每一种细菌都有一定

的抗菌药物组合供选择。要准确进行药敏组合选择,就必须有准确的细

胞形态学结果作支持。

?3菌体特殊结构的观察

?3.1荚膜荚膜是某些细菌在细胞壁外包裹的一层粘液性物质,

不同的细菌其荚膜成分也有一定差异,一般由多糖、多肽或蛋白质组

成。荚膜作为细菌的毒力因子有必要对其染色观察,但荚膜染色对于临

床标本分离菌株的鉴定价值并不大。图7所示为大肠埃希菌荚膜染色结

果。

?3.2鞭毛观察细菌鞭毛对于细菌鉴定具有重要的价值。依据鞭

毛位置和数量,细菌分为单端极鞭毛菌、单端双鞭毛菌、单端丛鞭毛

菌、周鞭毛菌、侧鞭毛菌。鞭毛是细菌的动力器官,大多数情况下可用

动力试验验证细菌鞭毛的存在,但动力试验无法代替鞭毛染色在细

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