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病毒与细胞间的相互作用

第一节病毒的细胞培养

第二节病毒与细胞的相互作用

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第一节病毒的细胞培养

病毒是严格的细胞内寄生微生物，培养病

毒必须使用细胞。根据病毒的不同选用敏感动

物〔动物接种〕、鸡胚〔鸡胚接种〕或离体细

胞进行别离培养〔细胞培养〕。

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一、动物接种

接种后通常以动物发病、死亡作为感染的指标。

按病毒侵袭部位不同选择适当

的接种途径。嗜神经病毒接种

在小鼠的脑内。痘苗病毒和单

纯疱疹病毒接种于家兔角膜。

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动物接种的优缺点：

优点：〔1〕不需要复杂的仪器设备；

〔2〕技术简单；

〔3〕易成功

缺点：〔1〕个体差异大

〔2〕价格昂贵

〔3〕数量有限

〔4〕需要隔离畜舍

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二鸡胚接种

一种比较经济简便的方法。

卵壳

壳膜

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鸡胚接种的优缺点：

优点：技术简单、来源充分、价格低廉、数量可大，

不需特殊设备

缺点：很多病毒不能适应，主要是哺乳动物的病毒。

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三、细胞培养

细胞培养(cellculture)是指利用机械、酶或化学方法使

动物组织或传代细胞分散成单个乃至2～4个细胞团悬

液进行培养。

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优点：

每个细胞生理特性根本一致，对病毒易感

性相等

无个体差异，准确性和重复性好

可严格执行无菌操作

细胞培养本身就能显示病毒的生长特征

应用空斑技术可进行病毒的克隆化

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〔一细胞的类型

根据细胞来源、染色体特征及传代次数，可分为三种类型：

n原代细胞：动物组织经胰蛋白酶消化处理，使细胞分散

而得到的细胞。

n二倍体细胞：将长成单层的原代细胞消化分散成单个细

胞，继续培养传代，其染色体数与原代细胞一样，保持其

二倍染色体数目的细胞，称为二倍体细胞。

n传代细胞：能在体外持续增殖传代的细胞，大多数由癌

细胞或二倍体细胞突变而成。

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〔二〕细胞培养的方法

1.静置培养：实验室常用。细胞悬液装瓶，

5%CO2温箱静置培养，细胞沉降并贴附在玻面

上生长分裂，最后长成单层。

2.旋转培养：大规模生产疫苗。细胞在玻瓶内生

长时，玻瓶不断缓慢旋转，细胞贴附于玻瓶四周，

长成单层。

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第二节病毒与细胞的相互作用

n杀细胞感染

n非杀细胞感染

引致持续感染，对细胞代谢无影响。

n产生干扰素

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一、病毒引致的杀细胞变化

〔一〕细胞病变效应(cytopathiceffect,CPE)

由病毒感染导致的细胞损伤。CPE能在光学显微镜下观察。

①细胞圆缩，如痘病毒和呼肠孤病