DB34T 3660-2020 鸭肝炎病毒1型和3型双重RT-PCR检测方法　.pdfVIP

ICS11.220

B41

DB34

安徽省地方标准

DB34/T3660—2020

鸭肝炎病毒1型和3型双重RT-PCR

检测方法

DuplexRT-PCRassayfordetectionofduckhepatitisvirustype1andtype3

2020-08-03发布2020-09-03实施

安徽省市场监督管理局发布

DB34/T3660—2020

前言

本标准按照GB/T1.1-2009给出的规则起草。

本标准由安徽省农业科学院畜牧兽医研究所提出。

本标准由安徽省农业标准化技术委员会归口。

本标准起草单位：安徽省农业科学院畜牧兽医研究所、安徽省动物疫病预防与控制中心、太湖县小

池镇农业农村综合服务中心、合肥野生动物园、铜陵市动物疫病预防与控制中心、铜陵市义安区畜牧兽

医局。

本标准主要起草人：潘孝成、占松鹤、沈学怀、何学丰、郭长进、范萍萍、尹磊、赵瑞宏、戴银、

何为俊、吴娟、胡晓苗、侯宏艳、周学利、张丹俊、周迎春、王军。

I

DB34/T3660—2020

鸭肝炎病毒1型和3型双重RT-PCR检测方法

1范围

本标准规定了鸭肝炎病毒1型（DHV-1）和鸭肝炎病毒3型（DHV-3）双重RT-PCR检测方法的技术要求。

本标准适用于鸭病变肝组织、接种疑似病料的鸭胚尿囊液或细胞培养物中DHV-1型和DHV-3型核酸的

检测。

2缩略语

下列缩略语适用于本文件。

DHV：鸭肝炎病毒(duckhepatitisvirus）

RT-PCR：反转录聚合酶链式反应（reversetranscription-polymerasechainreaction）

RNA：核糖核酸（ribonucleicacid）

DNA：脱氧核糖核酸（deoxyribonucleicacid）

DEPC：焦炭酸二乙酯（diethylpyrocarbonate）

Taq酶：TaqDNA聚合酶（TaqDNApolymerase）

dNTP：脱氧核糖核苷三磷酸（deoxy-ribonucleosidetriphosphate）

M-MLV：莫洛尼氏鼠白血病病毒（moloneymurineleukemiavirus）

PBS：磷酸缓冲液（phosphatebuffersolution）

TAE：Tris-乙酸电泳缓冲液（trisacetate-EDTAbuffer）

EB：溴化乙锭（ethidiumbromide）

3主要仪器

3.1PCR扩增仪。

3.2台式低温高速离心机（最大离心力12000g以上）。

3.3电泳仪。

3.4凝胶成像系统。

3.5冰箱（-20℃;-80℃)。

3.6微波炉。

3.7分析天平（感量0.01g）。

3.8水浴锅。

3.9微量移液器（2.5µL；10µL；200µL；1000µL）。

4试剂

4.1RNA抽提试剂：Trizol或其他商品化RNA提取试剂。

4.2氯仿、异丙醇、无水乙醇，均为分析纯。

1

DB34/T3660—2020

4.3