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乙型肝炎病毒表面抗原测定(绝对定量)标准操作规程

1检验申请

单独检验项目申请：乙型肝炎病毒表面抗原测定(HBsAgIIquant)；

组合项目申请：乙肝病毒项目组合。临床医生根据乙肝患者抗病毒疗效监测需要提出检验申

请。

2标本采集与处理

2.1标本采集

2.1.1常规静脉采血约2ml，置含分离胶的真空采血管（黄盖管）。

2.1.2采用电子检验申请单，血标本试管粘贴附患者信息的条形码。

2.1.3标本采集后，通过LIS及标本条形码管理系统记录标本采集时间。

2.1.4标本采集后及时运送至实验诊断中心。由标本处理中心负责标本的接收并记录标本的状

态，对不合格标本予以拒收。

2.1.5不合格标本

2.1.5.1标本量不足：少于0.3ml的全血标本，或少于0.1ml的血清或血浆。

2.1.5.2无法确认标本与申请单对应关系的。

2.1.5.3其他如标识涂改、标本试管破裂等。

注：严重溶血或脂浊的标本,应在检验报告中标注标本状况，并建议复查；并在工作日志中记录。

2.2标本保存

2.2.1接收标本后在30min内将标本离心分离出血清。

2.2.2标本保存时间：室温（20℃～25℃）下可稳定一周，普通冰箱中（2℃～8℃）7天，-20℃

3个月。样本可以冻存5次。为避免标本中水分挥发使血清浓缩，对保存时间超过1d的标本均

加塞密闭或覆盖湿巾。

2.2.3已完成测试的标本保持完整的识别号，置2℃～8℃冰箱内保存7d。

2.3标本采集注意事项

2.3.1采血前使受检者保持平静、松弛状态。

2.3.2不建议采集抗凝血标本，如果必须使用血浆，推荐的抗凝剂是肝素。

3方法原理

用免疫学方法定性测定人血清或血浆中的针对乙肝病毒表面抗原。采用双抗体夹心法原理，

①第一次孵育：将含有样本，两种生物素化的anti-HBsAg单克隆抗体与钌复合体标记的一种

anti-HBsAg单克隆抗体和anti-HBsAg多克隆抗体形成一种夹心复合体；②第二次孵育：加入链

霉亲合素包被的微粒后抗原，该复合体通过生物素与链霉亲合素的相互作用与结合；③将反应液

吸入测量池中，通过电磁作用将磁珠吸附在电极表面，未与磁珠结合的物质通过Procell被去除。

给电极加以一定的电压，使复合体化学发光，并通过光电倍增器测量发光强度④通过检测仪的定

标曲线得到最后的检测结果。

4试剂及其他用品

4.1试剂：免疫学方法测定乙型肝炎病毒表面抗原定量检测试剂盒，由罗氏公司出品。

4.2试剂盒保存：避光保存于2℃～8℃，未开封时可保存至有效期。开盖后放于仪器的试剂仓

冰箱中可至少稳定8周。请勿使用变质试剂。

4.3试剂盒准备：液态双试剂型，即开即用，无特殊准备。

4.4试剂盒主要成分：

M:链霉亲合素包被的微粒（透明瓶盖）0.72mg/ml6.5ml

试剂1(R1)：生物素化的anti-HBsAg单克隆抗体0.5mg/L8ml；

试剂2(R2)：Ru(bpy)标记的anti-HBsAg抗体1.5mg/L7ml

3

5校准品与校准模式

5.1ElecsysHBsAgIIquantCall定标液。定标品值可溯源到NIBSC标准。

5.2校准类型和校准点数目：线性模式，2个校准点。

5.3校准液重建方法：即开即用，无特殊准备。。

5.4注：①更换试剂批号或出现质控结果指示需重建标准曲线时；②仪器进行全面保养后；③

仪器的重要零件更换后；均须进行一次校准。

6质控品与室内质控规则

6.1质控液：ElecsysPreciControlHBsAgII质控液

6.2质控液重建方法：按瓶标示进行溶解。

6.3质控品测定：在每一测试批标本中测定两个水平质控血清（High/Low）各一次。

6.4质控规则：采用Westgard多规则质控规则。

6.5如出现失控情况，按室内质控标准操作程序采取各种有效的纠正措施及时纠正，并在确认

重新回复到控制状态后开始标本检测。

7适用仪器

适用罗氏cobase601/e602全自动免疫分析仪。

8标本检测步骤

装载试剂→进行校准→进行质控